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J774A.1
Tecido
Retículo
Doença
Sarcoma
Sinónimos
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

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J774A.1

Cell line · Número do produto 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha celular J774A.1 foi derivada do tumor ascítico de um rato BALB/c/NIH fêmea durante o tratamento de indução de plasmocitoma. As células são conhecidas pela sua capacidade de realizar fagocitose dependente de anticorpos, o que as torna uma ferramenta útil para investigar as respostas imunitárias a vários antigénios.

O crescimento das células J774A.1 é inibido por várias substâncias, incluindo sulfato de dextrano, p-fenilenodiamina (PPD) e lipopolissacárido (LPS). As células J774A.1 sintetizam grandes quantidades de lisozima e são conhecidas por sintetizar continuamente interleucina-1 beta.
As células J774A.1 têm um tempo de duplicação de 17 horas e podem ser cultivadas nas mesmas condições que os macrófagos RAW 264.7. Além disso, sabe-se que a linha celular J774A.1 expressa genes específicos, incluindo a interleucina-1 (IL-1) e a lisozima, bem como marcadores de expressão específicos, como o complemento (C3) e o recetor Fc de alta afinidade, IgG (Fcgr1).

A linha celular J774A.1 tem sido utilizada em vários estudos de imunologia e doenças infecciosas. Por exemplo, foi utilizada para investigar a citotoxicidade de sais de triazolo[1,5-a]piridínio com atividade leishmanicida e a atividade antitripanossomática de glicosídeos flavonóides isolados de espécies de Delphinium.

Em geral, as células J774A.1 são um instrumento valioso para estudar a função dos macrófagos, a síntese de citocinas e a resposta imunitária a vários antigénios e agentes patogénicos.

Tecido
Retículo
Doença
Sarcoma
Sinónimos
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Macrófago

04Identificadores

Referência
J774A.1 (número de catálogo Cytion 400220)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Imunoglobulina (Fc), complemento (C3)
Produtos
Interleucina-1 (interleucina 1, IL-1, LAF), lisozima

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Recomenda-se a separação das células através de um raspador de células. Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
Adulto