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- Retículo
- Doença
- Sarcoma
- Sinónimos
- J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1
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J774A.1
Cell line · Número do produto 400220
The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...
Personalização / Recomendações
- J774A.1Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular J774A.1 foi derivada do tumor ascítico de um rato BALB/c/NIH fêmea durante o tratamento de indução de plasmocitoma. As células são conhecidas pela sua capacidade de realizar fagocitose dependente de anticorpos, o que as torna uma ferramenta útil para investigar as respostas imunitárias a vários antigénios.
O crescimento das células J774A.1 é inibido por várias substâncias, incluindo sulfato de dextrano, p-fenilenodiamina (PPD) e lipopolissacárido (LPS). As células J774A.1 sintetizam grandes quantidades de lisozima e são conhecidas por sintetizar continuamente interleucina-1 beta.
As células J774A.1 têm um tempo de duplicação de 17 horas e podem ser cultivadas nas mesmas condições que os macrófagos RAW 264.7. Além disso, sabe-se que a linha celular J774A.1 expressa genes específicos, incluindo a interleucina-1 (IL-1) e a lisozima, bem como marcadores de expressão específicos, como o complemento (C3) e o recetor Fc de alta afinidade, IgG (Fcgr1).A linha celular J774A.1 tem sido utilizada em vários estudos de imunologia e doenças infecciosas. Por exemplo, foi utilizada para investigar a citotoxicidade de sais de triazolo[1,5-a]piridínio com atividade leishmanicida e a atividade antitripanossomática de glicosídeos flavonóides isolados de espécies de Delphinium.
Em geral, as células J774A.1 são um instrumento valioso para estudar a função dos macrófagos, a síntese de citocinas e a resposta imunitária a vários antigénios e agentes patogénicos.
- Tecido
- Retículo
- Doença
- Sarcoma
- Sinónimos
- J-774A.1
- J774A1
- J774 A1
- J774A.1
- J 774A.1
- J774 A.1
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Tipo de célula
- Macrófago
04Identificadores
- Referência
- J774A.1 (número de catálogo Cytion 400220)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0358
05Expressão e suscetibilidade
- Receptores expressos
- Imunoglobulina (Fc), complemento (C3)
- Produtos
- Interleucina-1 (interleucina 1, IL-1, LAF), lisozima
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Recomenda-se a separação das células através de um raspador de células. Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 1 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- BALB/c
- Idade do dador
- Adulto
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Aviso legal
- As nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de investigação laboratorial in vitro e não se destinam a utilização clínica ou de diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os utilizadores devem aderir a todas as diretrizes e regulamentos aplicáveis para o manuseamento e utilização destas células num ambiente de investigação.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim