İçeriğe atla
KGN
Doku
Yumurtalık, yumurtalık folikülü, granüloza hücre tabakası
Hastalık
Yumurtalık granüloza hücre tümörü

KGN

Cell line · Ürün numarası 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KGN hücre hattı, yumurtalık kanserli bir hastadan türetilen ve çeşitli araştırma çalışmalarında kullanılmak üzere ölümsüzleştirilen bir insan yumurtalık granüloza tümör hücre hattıdır. Hormon sentezi de dahil olmak üzere granüloza hücrelerinin işlevsel özelliklerini korur ve granüloza hücresi işlevlerini, hormonal düzenlemeyi ve yumurtalık patolojisini incelemek için değerli bir model haline getirir. KGN hücreleri, polikistik over sendromu (PCOS) gibi üreme ve endokrin bozukluklarının altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için kullanılmıştır. Özellikle oksidatif stresi (OS) indükleyebilen ve mitokondriyal fonksiyonu etkileyebilen araşidonik asit (AA) gibi çoklu doymamış yağ asitlerine verdikleri yanıtla dikkat çekmektedirler.

Araştırmalar, KGN hücrelerinde AA'ya maruz kalmanın reaktif oksijen türleri (ROS) ve malondialdehit (MDA) gibi oksidatif belirteçlerin seviyelerini yükselttiğini, toplam antioksidan kapasiteyi azalttığını ve mitokondriyal aktiviteyi bozarak hücre apoptozuna yol açtığını göstermiştir. Bu süreç, oksidatif stresin neden olduğu hücresel hasara karşı koruyucu bir rol oynadığı görülen büyüme farklılaşma faktörü 15'in (GDF15) yukarı regülasyonu ile ilişkilidir. Ek olarak, KGN hücreleri, lipid peroksidasyonu ve oksidatif stres ile karakterize edilen demire bağlı bir hücre ölümü şekli olan ferroptoza duyarlıdır. Çalışmalar, transferrin reseptörünün aracılık ettiği demir alımının ROS üretimini teşvik edebileceğini ve bu yola katkıda bulunabileceğini vurgulamaktadır.

Ayrıca, miR-93-5p, NF-κB sinyal yolu aracılığıyla apoptoz ve ferroptozu teşvik eden bir faktör olarak tanımlandığından, KGN hücreleri mikroRNA'ların hücre işlevi üzerindeki etkisini incelemek için kullanılmıştır ve miRNA düzenlemesini PCOS'taki granüloza hücresi işlev bozukluğuna bağlamaktadır. Bu özellikler, KGN hücrelerini yumurtalık patofizyolojisinin anlaşılmasını ilerletmek ve potansiyel terapötik hedefleri keşfetmek için önemli bir model haline getirmektedir.

Doku
Yumurtalık, yumurtalık folikülü, granüloza hücre tabakası
Hastalık
Yumurtalık granüloza hücre tümörü

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KGN (Cytion katalog numarası 305446)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
63 yıl
Etnik köken
Japonca