Премини към съдържанието
KGN
Тъкан
Яйчник, яйчников фоликул, гранулозен клетъчен слой
Заболяване
Гранулозно-клетъчен тумор на яйчниците

Документи

KGN

Cell line · Номер на продукта 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KGN е човешка клетъчна линия на яйчников гранулозен тумор, получена от пациентка с рак на яйчниците и имортализирана за използване в различни научни изследвания. Тя запазва функционалните характеристики на гранулозните клетки, включително синтеза на хормони, което я прави ценен модел за изследване на функциите на гранулозните клетки, хормоналната регулация и патологията на яйчниците. Клетките KGN са използвани за изследване на молекулярните механизми, които са в основата на репродуктивните и ендокринните нарушения, като например синдрома на поликистозните яйчници (PCOS). Те са особено известни с отговора си към полиненаситени мастни киселини като арахидонова киселина (АК), които могат да предизвикат оксидативен стрес (ОС) и да повлияят на митохондриалната функция.

Изследванията показват, че излагането на АА в клетките на KGN повишава нивата на оксидативни маркери като реактивни кислородни видове (ROS) и малондиалдехид (MDA), намалява общия антиоксидантен капацитет и влошава митохондриалната активност, което води до апоптоза на клетките. Този процес е свързан с повишаване на регулацията на фактора за диференциация на растежа 15 (GDF15), който изглежда изпълнява защитна роля срещу клетъчните увреждания, предизвикани от оксидативен стрес. Освен това KGN клетките са чувствителни към фероптоза - желязозависима форма на клетъчна смърт, характеризираща се с липидна пероксидация и оксидативен стрес. Проучванията подчертават, че поглъщането на желязо, опосредствано чрез рецептора за трансферин, може да насърчи производството на ROS и да допринесе за този път.

Освен това KGN клетките са използвани за изследване на въздействието на микроРНК върху клетъчната функция, тъй като miR-93-5p е идентифициран като фактор, стимулиращ апоптозата и фероптозата чрез сигналния път NF-κB, което свързва регулирането на miRNA с дисфункцията на гранулозните клетки при PCOS. Тези възможности превръщат KGN клетките в значим модел за подобряване на разбирането на патофизиологията на яйчниците и за проучване на потенциални терапевтични цели.

Тъкан
Яйчник, яйчников фоликул, гранулозен клетъчен слой
Заболяване
Гранулозно-клетъчен тумор на яйчниците

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти

04Идентификатори

Източник
KGN (каталожен номер 305446 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0375

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), хетерозиготен

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
63 години
Етническа принадлежност
Японски