Mine otse sisu juurde
KGN
Kude
Munasarjad, munasarjade folliikul, granulosa rakkude kiht
Haigus
Munasarjade granuloosarakkude kasvaja

Dokumendid

KGN

Cell line · Toote number 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KGN rakuliin on inimese munasarjade granulosa tuumori rakuliin, mis on saadud munasarjavähiga patsiendilt ja immortaliseeritud kasutamiseks erinevates teadusuuringutes. See säilitab granuloosarakkude funktsionaalsed omadused, sealhulgas hormoonsünteesi, mistõttu on see väärtuslik mudel granuloosarakkude funktsioonide, hormonaalse regulatsiooni ja munasarjade patoloogia uurimiseks. KGN rakke on kasutatud reproduktiivsete ja endokriinsete häirete, näiteks polütsüstiliste munasarjade sündroomi (PCOS) aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Nad on eriti tuntud oma reaktsiooni poolest polüküllastumata rasvhapetele, nagu arahhidoonhape (AA), mis võib esile kutsuda oksüdatiivset stressi (OS) ja mõjutada mitokondriide funktsiooni.

Uuringud on näidanud, et kokkupuude AA-ga KGN-rakkudes tõstab oksüdatiivsete markerite, nagu reaktiivsed hapnikuliigid (ROS) ja malondialdehüüd (MDA), taset, vähendab kogu antioksüdantide võimsust ja kahjustab mitokondriide aktiivsust, mis viib raku apoptoosini. See protsess on seotud kasvu diferentseerimisfaktori 15 (GDF15) ülereguleerimisega, millel näib olevat kaitsev roll oksüdatiivse stressi põhjustatud rakukahjustuste vastu. Lisaks on KGN rakud tundlikud ferroptoosi suhtes, mis on rauast sõltuv rakusurma vorm, mida iseloomustab lipiidide peroksüdatsioon ja oksüdatiivne stress. Uuringud rõhutavad, et transferriini retseptori kaudu vahendatud raua omastamine võib soodustada ROSi tootmist ja aidata kaasa sellele rajale.

Lisaks on KGN rakke kasutatud mikroRNAde mõju uurimiseks rakkude funktsioonile, kuna miR-93-5p on tuvastatud kui apoptoosi ja ferroptoosi edendav tegur NF-κB signaalitee kaudu, mis seob miRNA regulatsiooni granuloosarakkude düsfunktsiooniga PCOSi puhul. Need võimalused muudavad KGN-rakud oluliseks mudeliks munasarjade patofüsioloogia mõistmise edendamiseks ja võimalike terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks.

Kude
Munasarjad, munasarjade folliikul, granulosa rakkude kiht
Haigus
Munasarjade granuloosarakkude kasvaja

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed

04Tunnused

Viide
KGN (Cytioni katalooginumber 305446)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: Cys134Trp (c.402C>G), heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
63 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani