
- Kude
- Munasarjad, munasarjade folliikul, granulosa rakkude kiht
- Haigus
- Munasarjade granuloosarakkude kasvaja
Dokumendid
KGN
Cell line · Toote number 305446
The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...
Kohandamine / Soovitused
- KGNCell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
KGN rakuliin on inimese munasarjade granulosa tuumori rakuliin, mis on saadud munasarjavähiga patsiendilt ja immortaliseeritud kasutamiseks erinevates teadusuuringutes. See säilitab granuloosarakkude funktsionaalsed omadused, sealhulgas hormoonsünteesi, mistõttu on see väärtuslik mudel granuloosarakkude funktsioonide, hormonaalse regulatsiooni ja munasarjade patoloogia uurimiseks. KGN rakke on kasutatud reproduktiivsete ja endokriinsete häirete, näiteks polütsüstiliste munasarjade sündroomi (PCOS) aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Nad on eriti tuntud oma reaktsiooni poolest polüküllastumata rasvhapetele, nagu arahhidoonhape (AA), mis võib esile kutsuda oksüdatiivset stressi (OS) ja mõjutada mitokondriide funktsiooni.
Uuringud on näidanud, et kokkupuude AA-ga KGN-rakkudes tõstab oksüdatiivsete markerite, nagu reaktiivsed hapnikuliigid (ROS) ja malondialdehüüd (MDA), taset, vähendab kogu antioksüdantide võimsust ja kahjustab mitokondriide aktiivsust, mis viib raku apoptoosini. See protsess on seotud kasvu diferentseerimisfaktori 15 (GDF15) ülereguleerimisega, millel näib olevat kaitsev roll oksüdatiivse stressi põhjustatud rakukahjustuste vastu. Lisaks on KGN rakud tundlikud ferroptoosi suhtes, mis on rauast sõltuv rakusurma vorm, mida iseloomustab lipiidide peroksüdatsioon ja oksüdatiivne stress. Uuringud rõhutavad, et transferriini retseptori kaudu vahendatud raua omastamine võib soodustada ROSi tootmist ja aidata kaasa sellele rajale.
Lisaks on KGN rakke kasutatud mikroRNAde mõju uurimiseks rakkude funktsioonile, kuna miR-93-5p on tuvastatud kui apoptoosi ja ferroptoosi edendav tegur NF-κB signaalitee kaudu, mis seob miRNA regulatsiooni granuloosarakkude düsfunktsiooniga PCOSi puhul. Need võimalused muudavad KGN-rakud oluliseks mudeliks munasarjade patofüsioloogia mõistmise edendamiseks ja võimalike terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks.
- Kude
- Munasarjad, munasarjade folliikul, granulosa rakkude kiht
- Haigus
- Munasarjade granuloosarakkude kasvaja
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Fibroblastilaadsed
04Tunnused
- Viide
- KGN (Cytioni katalooginumber 305446)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0375
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Mutatsiooniprofiil
- Mutatsioon: Cys134Trp (c.402C>G), heterosügootne
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 63 aastat
- Etniline kuuluvus
- Jaapani
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah