KGN

A linha de células KGN é uma linha de células tumorais da granulosa do ovário humano derivada de uma doente com cancro do ovário e imortalizada para utilização em vários estudos de investigação. Mantém as caraterísticas funcionais das células da granulosa, incluindo a síntese hormonal, o que a torna um modelo valioso para examinar as funções das células da granulosa, a regulação hormonal e a patologia do ovário. As células KGN têm sido utilizadas para investigar os mecanismos moleculares subjacentes a doenças reprodutivas e endócrinas, como a síndrome dos ovários poliquísticos (SOP). São particularmente conhecidas pela sua resposta aos ácidos gordos poli-insaturados, como o ácido araquidónico (AA), que podem induzir o stress oxidativo (SO) e afetar a função mitocondrial.

A investigação demonstrou que a exposição ao AA nas células KGN eleva os níveis de marcadores oxidativos, como as espécies reactivas de oxigénio (ROS) e o malondialdeído (MDA), reduz a capacidade antioxidante total e prejudica a atividade mitocondrial, conduzindo à apoptose celular. Este processo está associado à regulação positiva do fator de diferenciação do crescimento 15 (GDF15), que parece desempenhar um papel protetor contra os danos celulares induzidos pelo stress oxidativo. Além disso, as células KGN são sensíveis à ferroptose, uma forma de morte celular dependente do ferro, caracterizada pela peroxidação lipídica e pelo stress oxidativo. Estudos salientam que a captação de ferro mediada pelo recetor da transferrina pode promover a produção de ROS e contribuir para esta via.

Além disso, as células KGN têm sido utilizadas para estudar o impacto dos microRNAs na função celular, uma vez que o miR-93-5p foi identificado como um fator que promove a apoptose e a ferroptose através da via de sinalização NF-κB, ligando a regulação do miRNA à disfunção das células da granulosa na SOP. Estas capacidades fazem das células KGN um modelo importante para a compreensão da fisiopatologia do ovário e para a exploração de potenciais alvos terapêuticos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia