KGN

Buněčná linie KGN je lidská ovariální granulózová nádorová buněčná linie odvozená od pacientky s rakovinou vaječníků a imortalizovaná pro použití v různých výzkumných studiích. Zachovává si funkční vlastnosti granulózových buněk, včetně syntézy hormonů, což z ní činí cenný model pro zkoumání funkcí granulózových buněk, hormonální regulace a patologie vaječníků. KGN buňky byly využity ke zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem reprodukčních a endokrinních poruch, jako je syndrom polycystických vaječníků (PCOS). Jsou zvláště známé svou reakcí na polynenasycené mastné kyseliny, jako je kyselina arachidonová (AA), která může vyvolat oxidační stres (OS) a ovlivnit funkci mitochondrií.

Výzkum ukázal, že expozice AA v buňkách KGN zvyšuje hladiny oxidačních markerů, jako jsou reaktivní formy kyslíku (ROS) a malondialdehyd (MDA), snižuje celkovou antioxidační kapacitu a narušuje mitochondriální aktivitu, což vede k apoptóze buněk. Tento proces je spojen se zvýšenou regulací růstového diferenciačního faktoru 15 (GDF15), který zřejmě plní ochrannou úlohu před poškozením buněk vyvolaným oxidačním stresem. Buňky KGN jsou navíc citlivé na ferroptózu, což je forma buněčné smrti závislá na železe, která se vyznačuje peroxidací lipidů a oxidačním stresem. Studie zdůrazňují, že příjem železa zprostředkovaný prostřednictvím transferinového receptoru může podporovat produkci ROS a přispívat k této cestě.

Kromě toho byly buňky KGN použity ke studiu vlivu mikroRNA na funkci buněk, protože miR-93-5p byla identifikována jako faktor podporující apoptózu a ferroptózu prostřednictvím signální dráhy NF-κB, což spojuje regulaci miRNA s dysfunkcí granulózových buněk u PCOS. Díky těmto schopnostem jsou buňky KGN významným modelem pro lepší pochopení patofyziologie vaječníků a zkoumání potenciálních terapeutických cílů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení