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KGN
ティッシュ
卵巣、卵胞、顆粒膜細胞層
病気
卵巣顆粒膜細胞腫

KGN

Cell line · 製品番号 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

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01概要

説明

KGN細胞株は、卵巣癌患者由来のヒト卵巣顆粒膜腫瘍細胞株であり、様々な研究に使用するために不死化された。ホルモン合成を含む顆粒膜細胞の機能的特徴を維持しており、顆粒膜細胞の機能、ホルモン制御、卵巣病理を調べるための貴重なモデルとなっている。KGN細胞は、多嚢胞性卵巣症候群(PCOS)などの生殖・内分泌疾患の根底にある分子メカニズムの研究に利用されてきた。KGN細胞は、酸化ストレス(OS)を誘発し、ミトコンドリア機能に影響を与えるアラキドン酸(AA)のような多価不飽和脂肪酸に対する応答で特に注目されている。

研究により、KGN細胞においてAAに暴露されると、活性酸素種(ROS)やマロンジアルデヒド(MDA)などの酸化マーカーのレベルが上昇し、総抗酸化能が低下し、ミトコンドリア活性が損なわれ、細胞のアポトーシスにつながることが示されている。この過程は成長分化因子15(GDF15)のアップレギュレーションと関連しており、GDF15は酸化ストレスによって誘発される細胞障害に対して保護的な役割を果たしているようである。さらに、KGN細胞はフェロプトーシス(脂質過酸化と酸化ストレスを特徴とする鉄依存性の細胞死)に対して感受性が高い。研究では、トランスフェリン受容体を介した鉄の取り込みが活性酸素の産生を促進し、この経路に寄与することが強調されている。

さらに、miR-93-5pがNF-κBシグナル伝達経路を通じてアポトーシスとフェロプターシスを促進する因子として同定され、PCOSにおける顆粒膜細胞の機能障害とmiRNAの調節が関連していることから、KGN細胞は細胞機能に対するマイクロRNAの影響を研究するために使用されている。これらの機能により、KGN細胞は卵巣病態生理学の理解を進め、潜在的な治療標的を探索するための重要なモデルとなっている。

ティッシュ
卵巣、卵胞、顆粒膜細胞層
病気
卵巣顆粒膜細胞腫

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様

04識別子

引用
KGN (Cytion カタログ番号 305446)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0375

05発現と感受性

変異プロファイル
変異:FOXL2、p.Cys134Trp(c.402C>G)、ヘテロ接合体

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
63年
民族
日本語