Ga naar de inhoud
KGN
Weefsel
Eierstok, eierstokfollikel, granulosacellaag
Ziekte
Ovariële granulosa celtumor

Documenten

KGN

Cell line · Productnummer 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op bestelling gemaakt
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KGN cellijn is een menselijke eierstok granulosa tumor cellijn afkomstig van een patiënt met eierstokkanker en geïmmortaliseerd voor gebruik in verschillende onderzoeken. Het behoudt de functionele kenmerken van granulosacellen, waaronder hormoonsynthese, waardoor het een waardevol model is voor het onderzoeken van granulosacelfuncties, hormonale regulatie en ovariële pathologie. KGN-cellen zijn gebruikt om de moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan reproductieve en endocriene aandoeningen zoals het polycysteus ovarium syndroom (PCOS). Ze staan vooral bekend om hun reactie op meervoudig onverzadigde vetzuren zoals arachidonzuur (AA), die oxidatieve stress (OS) kunnen induceren en de mitochondriale functie kunnen beïnvloeden.

Onderzoek heeft aangetoond dat blootstelling aan AA in KGN-cellen de niveaus van oxidatieve markers zoals reactieve zuurstofsoorten (ROS) en malondialdehyde (MDA) verhoogt, de totale antioxidantcapaciteit verlaagt en de mitochondriale activiteit aantast, wat leidt tot celapoptose. Dit proces gaat gepaard met de upregulatie van groeidifferentiatiefactor 15 (GDF15), die een beschermende rol lijkt te spelen tegen cellulaire schade veroorzaakt door oxidatieve stress. Daarnaast zijn KGN-cellen gevoelig voor ferroptose, een ijzerafhankelijke vorm van celdood die wordt gekenmerkt door lipide peroxidatie en oxidatieve stress. Studies benadrukken dat ijzeropname gemedieerd door de transferrinereceptor de productie van ROS kan bevorderen en kan bijdragen aan deze pathway.

Bovendien zijn KGN-cellen gebruikt om de invloed van microRNA's op de celfunctie te bestuderen, aangezien miR-93-5p is geïdentificeerd als een factor die apoptose en ferroptose bevordert via de NF-κB-signaleringsroute, waardoor miRNA-regulatie in verband wordt gebracht met het disfunctioneren van granulosacellen bij PCOS. Deze mogelijkheden maken KGN-cellen tot een belangrijk model voor een beter begrip van de pathofysiologie van de eierstokken en voor het verkennen van mogelijke therapeutische doelwitten.

Weefsel
Eierstok, eierstokfollikel, granulosacellaag
Ziekte
Ovariële granulosa celtumor

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KGN (Cytion catalogusnummer 305446)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
63 jaar
Etnische afkomst
Japans