
- Weefsel
- Eierstok, eierstokfollikel, granulosacellaag
- Ziekte
- Ovariële granulosa celtumor
Documenten
KGN
Cell line · Productnummer 305446
The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...
Maatwerk / Aanbevelingen
- KGNCell line€550.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
De KGN cellijn is een menselijke eierstok granulosa tumor cellijn afkomstig van een patiënt met eierstokkanker en geïmmortaliseerd voor gebruik in verschillende onderzoeken. Het behoudt de functionele kenmerken van granulosacellen, waaronder hormoonsynthese, waardoor het een waardevol model is voor het onderzoeken van granulosacelfuncties, hormonale regulatie en ovariële pathologie. KGN-cellen zijn gebruikt om de moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan reproductieve en endocriene aandoeningen zoals het polycysteus ovarium syndroom (PCOS). Ze staan vooral bekend om hun reactie op meervoudig onverzadigde vetzuren zoals arachidonzuur (AA), die oxidatieve stress (OS) kunnen induceren en de mitochondriale functie kunnen beïnvloeden.
Onderzoek heeft aangetoond dat blootstelling aan AA in KGN-cellen de niveaus van oxidatieve markers zoals reactieve zuurstofsoorten (ROS) en malondialdehyde (MDA) verhoogt, de totale antioxidantcapaciteit verlaagt en de mitochondriale activiteit aantast, wat leidt tot celapoptose. Dit proces gaat gepaard met de upregulatie van groeidifferentiatiefactor 15 (GDF15), die een beschermende rol lijkt te spelen tegen cellulaire schade veroorzaakt door oxidatieve stress. Daarnaast zijn KGN-cellen gevoelig voor ferroptose, een ijzerafhankelijke vorm van celdood die wordt gekenmerkt door lipide peroxidatie en oxidatieve stress. Studies benadrukken dat ijzeropname gemedieerd door de transferrinereceptor de productie van ROS kan bevorderen en kan bijdragen aan deze pathway.
Bovendien zijn KGN-cellen gebruikt om de invloed van microRNA's op de celfunctie te bestuderen, aangezien miR-93-5p is geïdentificeerd als een factor die apoptose en ferroptose bevordert via de NF-κB-signaleringsroute, waardoor miRNA-regulatie in verband wordt gebracht met het disfunctioneren van granulosacellen bij PCOS. Deze mogelijkheden maken KGN-cellen tot een belangrijk model voor een beter begrip van de pathofysiologie van de eierstokken en voor het verkennen van mogelijke therapeutische doelwitten.
- Weefsel
- Eierstok, eierstokfollikel, granulosacellaag
- Ziekte
- Ovariële granulosa celtumor
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Fibroblast-achtige
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- KGN (Cytion catalogusnummer 305446)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0375
05Expressie en vatbaarheid
- Mutatieprofiel
- Mutatie: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozygoot
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 63 jaar
- Etnische afkomst
- Japans
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja