Gå til innholdet
KGN
Vev
Eggstokk, eggstokkfollikkel, granulosacellelag
Sykdom
Granulosacelletumor i eggstokkene

Dokumenter

KGN

Cell line · Produktnummer 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KGN-cellelinjen er en human granulosacellelinje fra en pasient med eggstokkreft som er udødeliggjort for bruk i ulike forskningsstudier. Den opprettholder granulosacellenes funksjonelle egenskaper, inkludert hormonsyntese, noe som gjør den til en verdifull modell for å undersøke granulosacellefunksjoner, hormonell regulering og ovariepatologi. KGN-celler har blitt brukt til å undersøke de molekylære mekanismene som ligger til grunn for reproduktive og endokrine lidelser som polycystisk ovariesyndrom (PCOS). De er spesielt kjent for sin respons på flerumettede fettsyrer som arakidonsyre (AA), som kan indusere oksidativt stress (OS) og påvirke mitokondrienes funksjon.

Forskning har vist at eksponering for AA i KGN-celler øker nivåene av oksidative markører som reaktive oksygenforbindelser (ROS) og malondialdehyd (MDA), reduserer den totale antioksidantkapasiteten og svekker mitokondriell aktivitet, noe som fører til celleapoptose. Denne prosessen er forbundet med en oppregulering av vekstdifferensieringsfaktor 15 (GDF15), som ser ut til å ha en beskyttende rolle mot celleskader forårsaket av oksidativt stress. I tillegg er KGN-celler følsomme for ferroptose, en jernavhengig form for celledød som kjennetegnes av lipidperoksidasjon og oksidativt stress. Studier viser at jernopptak formidlet gjennom transferrinreseptoren kan fremme ROS-produksjon og bidra til denne prosessen.

Videre har KGN-celler blitt brukt til å studere mikroRNAs innvirkning på cellefunksjonen, ettersom miR-93-5p har blitt identifisert som en faktor som fremmer apoptose og ferroptose gjennom NF-κB-signalveien, noe som knytter miRNA-regulering til dysfunksjon i granulosaceller ved PCOS. Disse egenskapene gjør KGN-celler til en viktig modell for å øke forståelsen av ovariepatofysiologi og utforske potensielle terapeutiske mål.

Vev
Eggstokk, eggstokkfollikkel, granulosacellelag
Sykdom
Granulosacelletumor i eggstokkene

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KGN (Cytion-katalognummer 305446)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
63 år
Etnisitet
Japansk