Langsung ke isi
KGN
Tisu
Ovarium, folikel ovarium, lapisan sel granulosa
Penyakit
Tumor sel granulosa ovarium

KGN

Cell line · Nomor produk 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Dibuat sesuai pesanan
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel KGN adalah garis sel tumor granulosa ovarium manusia yang berasal dari pasien kanker ovarium dan diabadikan untuk digunakan dalam berbagai penelitian. Sel ini mempertahankan karakteristik fungsional sel granulosa, termasuk sintesis hormon, sehingga menjadikannya model yang berharga untuk memeriksa fungsi sel granulosa, regulasi hormon, dan patologi ovarium. Sel KGN telah digunakan untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendasari gangguan reproduksi dan endokrin seperti sindrom ovarium polikistik (PCOS). Sel ini sangat terkenal karena responsnya terhadap asam lemak tak jenuh ganda seperti asam arakidonat (AA), yang dapat menginduksi stres oksidatif (OS) dan berdampak pada fungsi mitokondria.

Penelitian telah menunjukkan bahwa paparan AA pada sel KGN meningkatkan kadar penanda oksidatif seperti spesies oksigen reaktif (ROS) dan malondialdehida (MDA), mengurangi kapasitas antioksidan total, dan mengganggu aktivitas mitokondria, yang menyebabkan apoptosis sel. Proses ini dikaitkan dengan peningkatan regulasi faktor diferensiasi pertumbuhan 15 (GDF15), yang tampaknya berperan sebagai pelindung terhadap kerusakan sel yang disebabkan oleh stres oksidatif. Selain itu, sel KGN sensitif terhadap ferroptosis, suatu bentuk kematian sel yang bergantung pada zat besi yang ditandai dengan peroksidasi lipid dan stres oksidatif. Studi menyoroti bahwa penyerapan zat besi yang dimediasi melalui reseptor transferin dapat meningkatkan produksi ROS dan berkontribusi pada jalur ini.

Selain itu, sel KGN telah digunakan untuk mempelajari dampak mikroRNA pada fungsi sel, karena miR-93-5p telah diidentifikasi sebagai faktor yang mendorong apoptosis dan ferroptosis melalui jalur pensinyalan NF-κB, yang menghubungkan regulasi miRNA dengan disfungsi sel granulosa pada PCOS. Kemampuan ini menjadikan sel KGN sebagai model yang signifikan untuk memajukan pemahaman patofisiologi ovarium dan mengeksplorasi target terapeutik yang potensial.

Tisu
Ovarium, folikel ovarium, lapisan sel granulosa
Penyakit
Tumor sel granulosa ovarium

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
KGN (nomor katalog Cytion 305446)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
Mutasi: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozigot

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
63 tahun
Etnis
Bahasa Jepang