Preskoči na vsebino
KGN
Tkivo
Jajčnik, folikel jajčnika, plast granuloznih celic
Bolezen
Granuloznocelični tumor jajčnikov

Dokumenti

KGN

Cell line · Številka izdelka 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KGN je človeška celična linija granuloznega tumorja jajčnika, pridobljena od pacientke z rakom jajčnika in imortalizirana za uporabo v različnih raziskavah. Ohranja funkcionalne značilnosti celic granuloza, vključno s sintezo hormonov, zato je dragocen model za preučevanje funkcij celic granuloza, hormonske regulacije in patologije jajčnikov. Celice KGN so bile uporabljene za raziskovanje molekularnih mehanizmov, na katerih temeljijo reproduktivne in endokrine motnje, kot je sindrom policističnih jajčnikov (PCOS). Zlasti so znane po svojem odzivu na polinenasičene maščobne kisline, kot je arahidonska kislina (AA), ki lahko povzroči oksidativni stres (OS) in vpliva na delovanje mitohondrijev.

Raziskave so pokazale, da izpostavljenost AA v celicah KGN zviša raven oksidativnih označevalcev, kot so reaktivne kisikove vrste (ROS) in malondialdehid (MDA), zmanjša skupno antioksidativno zmogljivost in poslabša mitohondrijsko aktivnost, kar vodi v apoptozo celic. Ta proces je povezan s povečano regulacijo rastnega diferenciacijskega faktorja 15 (GDF15), za katerega se zdi, da ima zaščitno vlogo pred poškodbami celic, ki jih povzroča oksidativni stres. Poleg tega so celice KGN občutljive na feroptozo, od železa odvisno obliko celične smrti, za katero sta značilna lipidna peroksidacija in oksidativni stres. Študije poudarjajo, da lahko privzem železa, ki ga posreduje transferinski receptor, spodbuja nastajanje ROS in prispeva k tej poti.

Poleg tega so bile celice KGN uporabljene za preučevanje vpliva mikroRNA na delovanje celic, saj je bil miR-93-5p opredeljen kot dejavnik, ki spodbuja apoptozo in feroptozo prek signalne poti NF-κB, kar povezuje regulacijo miRNA z disfunkcijo celic granuloza pri PCOS. Zaradi teh lastnosti so celice KGN pomemben model za boljše razumevanje patofiziologije jajčnikov in raziskovanje potencialnih terapevtskih ciljev.

Tkivo
Jajčnik, folikel jajčnika, plast granuloznih celic
Bolezen
Granuloznocelični tumor jajčnikov

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
KGN (Cytionova kataloška številka 305446)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
63 let
Etnična pripadnost
Japonski