Pāriet uz saturu
KGN
Audums
Olnīcas, olnīcu folikuls, granulozas šūnu slānis
Slimība
Olnīcu granulozas šūnu audzējs

Dokumenti

KGN

Cell line · Preces numurs 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Pēc pasūtījuma
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KGN šūnu līnija ir cilvēka olnīcu granulozes audzēja šūnu līnija, kas iegūta no pacientes ar olnīcu vēzi un imortalizēta izmantošanai dažādos pētījumos. Tā saglabā granulozas šūnu funkcionālās īpašības, tostarp hormonu sintēzi, padarot to par vērtīgu modeli granulozas šūnu funkciju, hormonālās regulācijas un olnīcu patoloģijas izpētei. KGN šūnas ir izmantotas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir reproduktīvo un endokrīno traucējumu, piemēram, policistisko olnīcu sindroma (PCOS), pamatā. Tās īpaši izceļas ar savu reakciju uz polinepiesātinātajām taukskābēm, piemēram, arahidonskābi (AA), kas var izraisīt oksidatīvo stresu (OS) un ietekmēt mitohondriju funkciju.

Pētījumi liecina, ka AA iedarbība KGN šūnās paaugstina oksidatīvo marķieru, piemēram, reaktīvo skābekļa sugu (ROS) un malondialdehīda (MDA), līmeni, samazina kopējo antioksidantu kapacitāti un pasliktina mitohondriālo aktivitāti, izraisot šūnu apoptozi. Šis process ir saistīts ar augšanas diferenciācijas faktora 15 (GDF15), kam, šķiet, ir aizsargfunkcija pret oksidatīvā stresa izraisītiem šūnu bojājumiem. Turklāt KGN šūnas ir jutīgas pret feroptozi - no dzelzs atkarīgu šūnu nāves formu, ko raksturo lipīdu peroksidācija un oksidatīvais stress. Pētījumos uzsvērts, ka dzelzs uzņemšana ar transferīna receptora starpniecību var veicināt ROS veidošanos un sekmēt šo ceļu.

Turklāt KGN šūnas ir izmantotas, lai pētītu mikro RNS ietekmi uz šūnu funkcijām, jo miR-93-5p ir identificēts kā faktors, kas veicina apoptozi un feroptozi, izmantojot NF-κB signalizācijas ceļu, kas saista miRNS regulāciju ar granulozas šūnu disfunkciju PCOS gadījumā. Šīs iespējas padara KGN šūnas par nozīmīgu modeli, lai uzlabotu izpratni par olnīcu patofizioloģiju un izpētītu potenciālos terapeitiskos mērķus.

Audums
Olnīcas, olnīcu folikuls, granulozas šūnu slānis
Slimība
Olnīcu granulozas šūnu audzējs

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs

04Identifikatori

Atsauce
KGN (Cytion kataloga numurs 305446)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
63 gadi
Etniskā piederība
Japāņu