Siirry sisältöön
KGN
Kudos
Munasarja, munasarjatiehyt, granuloosasolukerros
Sairaus
Munasarjojen granuloosasolukasvain

Asiakirjat

KGN

Cell line · Tuotenumero 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KGN-solulinja on ihmisen munasarjojen granulosa-kasvainsolulinja, joka on peräisin munasarjasyöpäpotilaalta ja joka on immortalisoitu käytettäväksi erilaisissa tutkimuksissa. Se säilyttää granuloosasolujen toiminnalliset ominaisuudet, mukaan lukien hormonisynteesi, mikä tekee siitä arvokkaan mallin granuloosasolujen toimintojen, hormonaalisen säätelyn ja munasarjojen patologian tutkimiseen. KGN-soluja on käytetty lisääntymis- ja hormonitoiminnan häiriöiden, kuten munasarjojen polykystisen oireyhtymän (PCOS), taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. Ne tunnetaan erityisesti niiden reagoinnista monityydyttymättömiin rasvahappoihin, kuten arakidonihappoon (AA), joka voi aiheuttaa oksidatiivista stressiä (OS) ja vaikuttaa mitokondrioiden toimintaan.

Tutkimukset ovat osoittaneet, että altistuminen AA:lle KGN-soluissa nostaa oksidatiivisten merkkiaineiden, kuten reaktiivisten happilajien (ROS) ja malondialdehydin (MDA) tasoja, vähentää kokonaisantioksidanttikapasiteettia ja heikentää mitokondrioiden toimintaa, mikä johtaa solujen apoptoosiin. Tähän prosessiin liittyy kasvun erilaistumistekijä 15:n (GDF15) ylössäätely, jolla näyttää olevan suojaava rooli oksidatiivisen stressin aiheuttamia soluvaurioita vastaan. Lisäksi KGN-solut ovat herkkiä ferroptoosille, joka on raudasta riippuvainen solukuoleman muoto, jolle on ominaista lipidiperoksidaatio ja oksidatiivinen stressi. Tutkimukset korostavat, että transferriinireseptorin kautta välittyvä raudan saanti voi edistää ROS-tuotantoa ja vaikuttaa tähän reittiin.

Lisäksi KGN-soluja on käytetty tutkimaan mikroRNA:iden vaikutusta solujen toimintaan, sillä miR-93-5p on tunnistettu tekijäksi, joka edistää apoptoosia ja ferroptoosia NF-κB-signalointireitin kautta, mikä yhdistää miRNA-säätelyn granuloosasolujen toimintahäiriöön PCOS:ssä. Nämä ominaisuudet tekevät KGN-soluista merkittävän mallin munasarjojen patofysiologian ymmärtämisen edistämiseksi ja mahdollisten terapeuttisten kohteiden tutkimiseksi.

Kudos
Munasarja, munasarjatiehyt, granuloosasolukerros
Sairaus
Munasarjojen granuloosasolukasvain

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset

04Tunnisteet

Lähdeviite
KGN (Cytionin luettelonumero 305446)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: Cys134Trp (c.402C>G), heterotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
63 vuotta
Etnisyys
Japanilainen