Gå direkt till innehållet
KGN
Vävnad
Äggstock, äggstocksfollikel, granulosacellager
Sjukdom
Granulosacelltumör i äggstocken

KGN

Cell line · Produktnummer 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

KGN-cellinjen är en human granulosatumörcellinje från äggstockarna som härrör från en patient med äggstockscancer och som odödliggjorts för användning i olika forskningsstudier. Den bibehåller de funktionella egenskaperna hos granulosaceller, inklusive hormonsyntes, vilket gör den till en värdefull modell för att undersöka granulosacellfunktioner, hormonell reglering och ovariepatologi. KGN-celler har använts för att undersöka de molekylära mekanismer som ligger bakom reproduktiva och endokrina sjukdomar, t.ex. polycystiskt ovariesyndrom (PCOS). De är särskilt kända för sin respons på fleromättade fettsyror som arakidonsyra (AA), som kan framkalla oxidativ stress (OS) och påverka mitokondriernas funktion.

Forskning har visat att exponering för AA i KGN-celler höjer nivåerna av oxidativa markörer som reaktiva syreföreningar (ROS) och malondialdehyd (MDA), minskar den totala antioxidantkapaciteten och försämrar mitokondrieaktiviteten, vilket leder till cellapoptos. Denna process är förknippad med uppregleringen av tillväxtdifferentieringsfaktor 15 (GDF15), som verkar ha en skyddande roll mot cellskador som orsakas av oxidativ stress. KGN-celler är dessutom känsliga för ferroptos, en järnberoende form av celldöd som kännetecknas av lipidperoxidation och oxidativ stress. Studier visar att järnupptag som förmedlas via transferrinreceptorn kan främja ROS-produktion och bidra till denna process.

Vidare har KGN-celler använts för att studera mikroRNA:s inverkan på cellfunktionen, eftersom miR-93-5p har identifierats som en faktor som främjar apoptos och ferroptos genom NF-KB-signalvägen, vilket kopplar miRNA-reglering till dysfunktion i granulosaceller vid PCOS. Dessa egenskaper gör KGN-cellerna till en viktig modell för att öka förståelsen för ovariernas patofysiologi och utforska potentiella terapeutiska mål.

Vävnad
Äggstock, äggstocksfollikel, granulosacellager
Sjukdom
Granulosacelltumör i äggstocken

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastliknande

04Identifierare

Källa
KGN (Cytion katalognummer 305446)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0375

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G), heterozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
63 år
Etnicitet
Japanska