الانتقال إلى المحتوى
KGN
الأنسجة
المبيض، جريب المبيض، طبقة الخلايا الحُبيبية
المرض
ورم الخلايا الحبيبية في المبيض

المستندات

KGN

Cell line · رقم المنتج 305446

The KGN cell line is a human ovarian granulosa tumor cell line derived from a patient with ovarian cancer and immortalized for use in various research stu...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا KGN هو خط خلايا أورام حبيبية مبيضية بشرية مشتقة من مريضة مصابة بسرطان المبيض وتم تخليدها لاستخدامها في دراسات بحثية مختلفة. وهي تحافظ على الخصائص الوظيفية للخلايا الحُبيبية بما في ذلك تخليق الهرمونات، مما يجعلها نموذجاً قيماً لفحص وظائف الخلايا الحُبيبية والتنظيم الهرموني وأمراض المبيض. وقد استُخدمت خلايا الخلايا الحُبيبية الحُبيبية في دراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء الاضطرابات التناسلية واضطرابات الغدد الصماء مثل متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS). وقد لوحظت هذه الخلايا بشكل خاص لاستجابتها للأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة مثل حمض الأراكيدونيك (AA)، والتي يمكن أن تحفز الإجهاد التأكسدي (OS) وتؤثر على وظيفة الميتوكوندريا.

وقد أظهرت الأبحاث أن التعرض لحمض الأراكيدونيك الدهني في خلايا خلايا الغدة الكظرية الكظرية يرفع مستويات علامات الأكسدة مثل أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ومالونديالديهايد (MDA)، ويقلل من القدرة الكلية المضادة للأكسدة، ويضعف نشاط الميتوكوندريا، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج. وترتبط هذه العملية بزيادة تنظيم عامل تمايز النمو 15 (GDF15)، والذي يبدو أنه يؤدي دورًا وقائيًا ضد التلف الخلوي الناجم عن الإجهاد التأكسدي. وبالإضافة إلى ذلك، فإن خلايا KGN حساسة لمرض فيروبتوزيسيس، وهو شكل من أشكال موت الخلايا المعتمد على الحديد والذي يتميز ببيروكسيد الدهون والإجهاد التأكسدي. وقد أبرزت الدراسات أن امتصاص الحديد بوساطة مستقبلات الترانسفيرين يمكن أن يعزز إنتاج الأكسدة التفاعلية ويساهم في هذا المسار.

علاوة على ذلك، تم استخدام خلايا KGN لدراسة تأثير الرنا الميكروي على وظيفة الخلية، حيث تم تحديد miR-93-5p كعامل يعزز موت الخلايا المبرمج والتسمم الحديدي من خلال مسار إشارات NF-κB، مما يربط تنظيم الرنا الميكروي بخلل الخلايا الحبيبية في متلازمة المبيض المتعدد الكيسات. تجعل هذه القدرات من خلايا الخلايا الحبيبية الحبيبية نموذجًا مهمًا لتعزيز فهم الفيزيولوجيا المرضية للمبيض واستكشاف الأهداف العلاجية المحتملة.

الأنسجة
المبيض، جريب المبيض، طبقة الخلايا الحُبيبية
المرض
ورم الخلايا الحبيبية في المبيض

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية

04المعرّفات

المرجع
KGN (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305446)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0375

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
طفرة: FOXL2, p.Cys134Trp (c.402C>G)، متغايرة الزيجوت

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
63 عاماً
الأصل العرقي
ياباني