Перейти до вмісту
NCI-H1373
Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
H1373, H-1373, NCIH1373

Документи

NCI-H1373

Cell line · Номер товару 305597

Клітинна лінія NCI-H1373 є моделлю недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ) людини, що містить мутацію KRAS G12C, яка часто асоціюється з онкогенними...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія NCI-H1373 є моделлю недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ) людини, що містить мутацію KRAS G12C, яка часто пов’язана з онкогенезом при аденокарциномі легенів. Ця мутація призводить до постійної активації низових сигнальних шляхів, таких як шляхи мітоген-активованої протеїнкінази (MAPK) та фосфоінозитид-3-кінази (PI3K), що сприяє проліферації та виживанню пухлини. NCI-H1373 широко використовується в дослідженнях для оцінки ефективності нових терапевтичних засобів, спрямованих на KRAS G12C та пов’язані з ним онкогенні шляхи.

У доклінічних дослідженнях NCI-H1373 застосовували для оцінки активності нових інгібіторів KRAS G12C, таких як ASP2453. Цей інгібітор продемонстрував потужне, селективне та ковалентне зв’язування з мутантним білком KRAS, пригнічуючи опосередковану KRAS сигналізацію та проліферацію пухлинних клітин in vitro. Цю клітинну лінію також використовували в моделях ксенотрансплантатів, де ASP2453 спричиняв значну регресію пухлини. Ця активність підкреслює корисність NCI-H1373 для розуміння терапевтичного потенціалу та механізмів дії нових інгібіторів KRAS.

Крім того, NCI-H1373 використовували в геномних скринінгах з нокаутом за допомогою CRISPR для вивчення механізмів резистентності до інгібіторів PARP7. Результати показали, що втрата сигнального шляху арилгідрокарбонового рецептора (AHR) пов’язана з резистентністю до інгібування PARP7, що вказує на потенційні стратегії комбінованого лікування. Такі дослідження демонструють роль клітинної лінії у виявленні шляхів резистентності та оптимізації цільових терапій для недрібноклітинного раку легенів (NSCLC) з мутацією KRAS G12C.

Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні

04Ідентифікатори

Посилання
NCI-H1373 (номер у каталозі Cytion 305597)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1465

05Експресія та сприйнятливість

Профіль мутацій
Мутація: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), гомозиготна; Мутація: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), гомозиготна

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини TrypLE Express, використовуючи 1-2 мл для колб T25 і 2,5 мл для колб T75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
56 років
Етнічна приналежність
Афроамериканець

Вам також може знадобитися