Gå direkte til indholdet
NCI-H1373
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
H1373, H-1373, NCIH1373

Dokumenter

NCI-H1373

Cell line · Varenummer 305597

NCI-H1373-cellelinjen er en model for humant ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der bærer KRAS G12C-mutationen, som ofte er forbundet med onkog...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-H1373-cellelinjen er en model for humant ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der bærer KRAS G12C-mutationen, som ofte er forbundet med kræftudviklingen i lungeadenokarcinom. Denne mutation medfører en konstant aktivering af nedstrøms signalveje, såsom mitogen-aktiveret proteinkinase (MAPK) og phosphoinositid 3-kinase (PI3K), hvilket fremmer tumorens spredning og overlevelse. NCI-H1373 anvendes i vid udstrækning i forskning til at evaluere effektiviteten af nye terapeutiske midler rettet mod KRAS G12C og relaterede onkogene signalveje.

I prækliniske studier er NCI-H1373 blevet anvendt til at vurdere aktiviteten af nye KRAS G12C-hæmmere, såsom ASP2453. Denne hæmmer udviste potent, selektiv og kovalent binding til det mutante KRAS-protein, hvilket undertrykte KRAS-medieret signalering og tumorcelleproliferation in vitro. Cellelinjen blev også anvendt i xenotransplantatmodeller, hvor ASP2453 inducerede en signifikant tumorregression. Denne aktivitet understreger NCI-H1373’s nytteværdi i forståelsen af det terapeutiske potentiale og mekanismerne bag nye KRAS-hæmmere.

Derudover er NCI-H1373 blevet anvendt i genomomfattende CRISPR-knockout-screeninger for at undersøge mekanismerne bag resistens over for PARP7-hæmmere. Resultaterne afslørede, at tab af signalering via arylhydrocarbonreceptoren (AHR) er forbundet med resistens over for PARP7-hæmning, hvilket antyder mulige kombinationsstrategier. Sådanne undersøgelser demonstrerer cellelinjens rolle i identificeringen af resistensveje og optimeringen af målrettede behandlinger mod KRAS G12C-muteret NSCLC.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H1373 (Cytion-katalognummer 305597)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
56 år
Etnisk tilhørsforhold
Afroamerikaner