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NCI-H1373
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
H1373, H-1373, NCIH1373

Documentos

NCI-H1373

Cell line · Número de producto 305597

La línea celular NCI-H1373 es un modelo de carcinoma pulmonar humano de células no pequeñas (NSCLC) que presenta la mutación KRAS G12C, la cual se asocia con frecuencia a oncog...

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01Información general

Descripción

La línea celular NCI-H1373 es un modelo de carcinoma pulmonar humano de células no pequeñas (NSCLC) que presenta la mutación KRAS G12C, la cual se asocia con frecuencia a la oncogénesis en el adenocarcinoma de pulmón. Esta mutación da lugar a la activación constitutiva de vías de señalización posteriores, como las de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) y la fosfoinositida 3-quinasa (PI3K), lo que impulsa la proliferación y la supervivencia del tumor. La línea celular NCI-H1373 se utiliza ampliamente en investigación para evaluar la eficacia de nuevos agentes terapéuticos dirigidos contra KRAS G12C y las vías oncogénicas relacionadas.

En estudios preclínicos, la línea NCI-H1373 se ha empleado para evaluar la actividad de inhibidores emergentes de KRAS G12C, como el ASP2453. Este inhibidor demostró una unión potente, selectiva y covalente a la proteína KRAS mutante, suprimiendo la señalización mediada por KRAS y la proliferación de las células tumorales in vitro. La línea celular también se utilizó en modelos de xenoinjertos, en los que el ASP2453 indujo una regresión tumoral significativa. Esta actividad subraya la utilidad del NCI-H1373 para comprender el potencial terapéutico y los mecanismos de los nuevos inhibidores de KRAS.

Además, la línea NCI-H1373 se ha utilizado en cribados de inactivación CRISPR a escala genómica para explorar los mecanismos de resistencia a los inhibidores de PARP7. Los resultados revelaron que la pérdida de la señalización del receptor de hidrocarburos arílicos (AHR) está asociada a la resistencia a la inhibición de PARP7, lo que sugiere posibles estrategias de combinación. Estos estudios demuestran el papel de la línea celular en la identificación de vías de resistencia y en la optimización de terapias dirigidas para el CPCNP con mutación KRAS G12C.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
NCI-H1373 (número de catálogo de Cytion 305597)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Expresión y susceptibilidad

Perfil mutacional
Mutación: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homocigótica; Mutación: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homocigótica

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezcle suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugue a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
56 años
Origen étnico
Afroamericanos