Ga naar de inhoud
NCI-H1373
Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
H1373, H-1373, NCIH1373

Documenten

NCI-H1373

Cell line · Productnummer 305597

De NCI-H1373-cellijn is een model van niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC) bij de mens dat de KRAS G12C-mutatie draagt, die vaak in verband wordt gebracht met oncog...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCI-H1373-cellijn is een model van humaan niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC) dat de KRAS G12C-mutatie draagt, welke vaak in verband wordt gebracht met oncogenese bij longadenocarcinoom. Deze mutatie leidt tot een constitutieve activering van stroomafwaartse signaalroutes, zoals de mitogeen-geactiveerde proteïnekinase (MAPK)- en fosfoinositide-3-kinase (PI3K)-routes, die de proliferatie en overleving van de tumor stimuleren. NCI-H1373 wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek om de werkzaamheid te evalueren van nieuwe therapeutische middelen die gericht zijn op KRAS G12C en aanverwante oncogene signaalroutes.

In preklinische studies is NCI-H1373 ingezet om de activiteit te beoordelen van opkomende KRAS G12C-remmers, zoals ASP2453. Deze remmer vertoonde een krachtige, selectieve en covalente binding aan het mutante KRAS-eiwit, waardoor KRAS-gemedieerde signalering en de proliferatie van tumorcellen in vitro werden onderdrukt. De cellijn werd ook gebruikt in xenotransplantaatmodellen, waar ASP2453 een significante tumorregressie teweegbracht. Deze activiteit onderstreept het nut van NCI-H1373 voor het begrijpen van het therapeutisch potentieel en de mechanismen van nieuwe KRAS-remmers.

Daarnaast is NCI-H1373 ingezet bij genoombrede CRISPR-knock-out-screens om de mechanismen van resistentie tegen PARP7-remmers te onderzoeken. De resultaten toonden aan dat het verlies van de arylhydrocarbonaatreceptor (AHR)-signalering geassocieerd is met resistentie tegen PARP7-remming, wat wijst op mogelijke combinatiestrategieën. Dergelijke studies tonen de rol van de cellijn aan bij het identificeren van resistentieroutes en het optimaliseren van gerichte therapieën voor KRAS G12C-gemuteerd NSCLC.

Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H1373 (Cytion-catalogusnummer 305597)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygoot; Mutatie: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
56 jaar
Etnische afkomst
Afro-Amerikaan