NCI-H1373

NCI-H1373-solulinja on ihmisen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) -malli, jossa esiintyy KRAS G12C -mutaatio, joka liittyy usein keuhkojen adenokarsinooman syövän syntyyn. Tämä mutaatio johtaa alavirran signalointireittien, kuten mitogeenin aktivoiman proteiinikinaasin (MAPK) ja fosfoinositidi 3-kinaasin (PI3K) reittien, konstitutiiviseen aktivoitumiseen, mikä edistää kasvaimen proliferaatiota ja selviytymistä. NCI-H1373-solulinjaa käytetään laajasti tutkimuksessa arvioitaessa KRAS G12C:tä ja siihen liittyviä syöpää aiheuttavia signaalireittejä kohdentavien uusien lääkeaineiden tehoa.

Prekliinisissä tutkimuksissa NCI-H1373:a on käytetty arvioimaan uusien KRAS G12C -estäjien, kuten ASP2453:n, aktiivisuutta. Tämä estäjä osoitti voimakkaan, selektiivisen ja kovalenttisen sitoutumisen mutanttiin KRAS-proteiiniin, mikä esti KRAS-välitteisen signalointireitin toimintaa ja kasvainsolujen proliferaatiota in vitro. Solulinjaa käytettiin myös ksenotransplantaattimalleissa, joissa ASP2453 aiheutti merkittävää kasvaimen kutistumista. Tämä vaikutus korostaa NCI-H1373:n hyödyllisyyttä uusien KRAS-estäjien terapeuttisen potentiaalin ja mekanismien ymmärtämisessä.

Lisäksi NCI-H1373:a on hyödynnetty koko genomin kattavissa CRISPR-knockout-seuloissa PARP7-estäjien vastustusmekanismien selvittämiseksi. Tulokset paljastivat, että aryylihiilivetyreseptorin (AHR) signalointireitin menetys liittyy PARP7-inhibiittoreiden vastustuskykyyn, mikä viittaa mahdollisiin yhdistelmähoitostrategioihin. Tällaiset tutkimukset osoittavat solulinjan merkityksen vastustusreittien tunnistamisessa ja KRAS G12C-mutaatioista kärsivän ei-pienisoluista keuhkosyövän (NSCLC) kohdennettujen hoitojen optimoinnissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa