NCI-H1373

Buněčná linie NCI-H1373 je model lidského nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) nesoucí mutaci KRAS G12C, která je často spojována s onkogenezí u adenokarcinomu plic. Tato mutace vede ke konstitutivní aktivaci navazujících signálních drah, jako jsou dráhy mitogenem aktivované protein kinázy (MAPK) a fosfoinositid-3-kinázy (PI3K), což podporuje proliferaci a přežití nádoru. NCI-H1373 se ve výzkumu hojně využívá k hodnocení účinnosti nových terapeutických látek zaměřených na KRAS G12C a související onkogenní signální dráhy.

V předklinických studiích byl NCI-H1373 použit k posouzení aktivity nových inhibitorů KRAS G12C, jako je například ASP2453. Tento inhibitor prokázal silnou, selektivní a kovalentní vazbu na mutovaný protein KRAS, čímž in vitro potlačoval signální přenos zprostředkovaný KRAS a proliferaci nádorových buněk. Tato buněčná linie byla rovněž použita v modelech xenotransplantátů, kde ASP2453 vyvolal významnou regresi nádoru. Tato aktivita podtrhuje užitečnost NCI-H1373 pro pochopení terapeutického potenciálu a mechanismů nových inhibitorů KRAS.

Kromě toho byla buněčná linie NCI-H1373 využita v celogenomových screeningových studiích s vyřazením genů pomocí CRISPR za účelem zkoumání mechanismů rezistence vůči inhibitorům PARP7. Výsledky odhalily, že ztráta signalizace arylhydrokarbonového receptoru (AHR) je spojena s rezistencí vůči inhibici PARP7, což naznačuje možné kombinované strategie léčby. Tyto studie dokládají roli této buněčné linie při identifikaci rezistenčních drah a optimalizaci cílených terapií pro NSCLC s mutací KRAS G12C.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení