Μετάβαση στο περιεχόμενο
NCI-H1373
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
H1373, H-1373, NCIH1373

Έγγραφα

NCI-H1373

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305597

Η κυτταρική σειρά NCI-H1373 αποτελεί μοντέλο ανθρώπινου μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) που φέρει τη μετάλλαξη KRAS G12C, η οποία συσχετίζεται συχνά με ογκογ...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά NCI-H1373 αποτελεί μοντέλο ανθρώπινου μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) που φέρει τη μετάλλαξη KRAS G12C, η οποία συνδέεται συχνά με την ογκογένεση στο αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα. Αυτή η μετάλλαξη έχει ως αποτέλεσμα τη διαρκή ενεργοποίηση των κατάντη σηματοδοτικών οδών, όπως οι οδοί της πρωτεϊνικής κινάσης που ενεργοποιείται από μιτογόνα (MAPK) και της φωσφοϊνοσιτίδης 3-κινάσης (PI3K), προωθώντας τον πολλαπλασιασμό και την επιβίωση του όγκου. Η σειρά κυττάρων NCI-H1373 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας νέων θεραπευτικών παραγόντων που στοχεύουν το KRAS G12C και τις σχετικές ογκογονικές οδούς.

Σε προκλινικές μελέτες, το NCI-H1373 έχει χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της δραστικότητας αναδυόμενων αναστολέων του KRAS G12C, όπως το ASP2453. Ο αναστολέας αυτός επέδειξε ισχυρή, επιλεκτική και ομοιοπολική σύνδεση με τη μεταλλαγμένη πρωτεΐνη KRAS, καταστέλλοντας τη σηματοδότηση που μεσολαβείται από το KRAS και τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων in vitro. Η κυτταρική σειρά χρησιμοποιήθηκε επίσης σε μοντέλα ξενομοσχεύματος, όπου το ASP2453 προκάλεσε σημαντική υποχώρηση του όγκου. Αυτή η δραστικότητα υπογραμμίζει τη χρησιμότητα του NCI-H1373 στην κατανόηση του θεραπευτικού δυναμικού και των μηχανισμών των νέων αναστολέων του KRAS.

Επιπλέον, η NCI-H1373 έχει χρησιμοποιηθεί σε διαγονιδιακές αναλύσεις απενεργοποίησης με CRISPR για τη διερεύνηση των μηχανισμών αντοχής στους αναστολείς PARP7. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι η απώλεια της σηματοδότησης του υποδοχέα αρυλικών υδρογονανθράκων (AHR) σχετίζεται με την αντοχή στην αναστολή του PARP7, υποδηλώνοντας πιθανές στρατηγικές συνδυαστικής θεραπείας. Τέτοιες μελέτες καταδεικνύουν τον ρόλο της κυτταρικής σειράς στον εντοπισμό οδών αντοχής και στη βελτιστοποίηση στοχευμένων θεραπειών για τον μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) με μετάλλαξη KRAS G12C.

Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NCI-H1373 (αριθμός καταλόγου Cytion 305597)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1465

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), ομόζυγη· Μετάλλαξη: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), ομόζυγη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με TrypLE Express, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
56 χρόνια
Εθνικότητα
Αφροαμερικανός

Ίσως χρειαστείτε επίσης