Pereiti prie turinio
NCI-H1373
Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
H1373, H-1373, NCIH1373

Dokumentai

NCI-H1373

Cell line · Prekės numeris 305597

NCI-H1373 ląstelių linija yra žmogaus nedidelio ląstelių plaučių karcinomos (NSCLC) modelis, kuriame yra KRAS G12C mutacija, dažnai siejama su onkog...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NCI-H1373 ląstelių linija yra žmogaus nedidelio ląstelių plaučių karcinomos (NSCLC) modelis, turintis KRAS G12C mutaciją, kuri dažnai siejama su plaučių adenokarcinomos onkogeneze. Ši mutacija sukelia nuolatinę pasroviui esančių signalinių kelių, pvz., mitogeno aktyvuotos proteinkinazės (MAPK) ir fosfoinozitido 3-kinazės (PI3K) kelių, aktyvaciją, skatinančią naviko proliferaciją ir išlikimą. NCI-H1373 plačiai naudojama moksliniuose tyrimuose, siekiant įvertinti naujų terapinių preparatų, nukreiptų prieš KRAS G12C ir susijusius onkogeninius signalizacijos kelius, veiksmingumą.

Ikiklinikiniuose tyrimuose NCI-H1373 buvo naudojamas naujų KRAS G12C inhibitorių, pvz., ASP2453, aktyvumui įvertinti. Šis inhibitorius parodė stiprų, selektyvų ir kovalentinį prisijungimą prie mutavusio KRAS baltymo, slopindamas KRAS tarpininkaujamą signalizavimą ir naviko ląstelių proliferaciją in vitro. Ši ląstelių linija taip pat buvo naudojama ksenotransplantacijos modeliuose, kur ASP2453 sukėlė žymią naviko regresiją. Šis aktyvumas pabrėžia NCI-H1373 naudą siekiant suprasti naujų KRAS inhibitorių terapinį potencialą ir mechanizmus.

Be to, NCI-H1373 buvo naudojama genomo masto CRISPR nokauto atrankose, siekiant ištirti atsparumo PARP7 inhibitoriams mechanizmus. Rezultatai parodė, kad arilhidrokarbonų receptoriaus (AHR) signalizacijos praradimas yra susijęs su atsparumu PARP7 slopinimui, o tai leidžia numatyti galimas kombinuotų gydymo strategijų galimybes. Tokie tyrimai parodo šios ląstelių linijos vaidmenį nustatant atsparumo mechanizmus ir optimizuojant tikslinį gydymą KRAS G12C mutaciją turinčiam neplaučių smulkiųjų ląstelių vėžiui (NSCLC).

Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
NCI-H1373 (Cytion katalogo numeris 305597)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigotinė; Mutacija: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tada visiškai užtepkite "TrypLE Express", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
56 metai
Etninė priklausomybė
Afroamerikietis