İçeriğe atla
NCI-H1373
Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
H1373, H-1373, NCIH1373

NCI-H1373

Cell line · Ürün numarası 305597

NCI-H1373 hücre hattı, sıklıkla onkogenlerle ilişkilendirilen KRAS G12C mutasyonunu barındıran bir insan küçük hücreli dışı akciğer karsinomu (NSCLC) modelidir...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H1373 hücre hattı, akciğer adenokarsinomunda onkogenezle sıklıkla ilişkilendirilen KRAS G12C mutasyonunu barındıran bir insan küçük hücreli dışı akciğer karsinomu (NSCLC) modelidir. Bu mutasyon, mitojenle aktive olan protein kinaz (MAPK) ve fosfoinositid 3-kinaz (PI3K) yolakları gibi aşağı akış sinyal yolaklarının konstitütif aktivasyonuna yol açarak tümörün çoğalmasını ve hayatta kalmasını tetikler. NCI-H1373, KRAS G12C ve ilgili onkojenik yolakları hedef alan yeni terapötik ajanların etkinliğini değerlendirmek amacıyla araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Preklinik çalışmalarda NCI-H1373, ASP2453 gibi yeni ortaya çıkan KRAS G12C inhibitörlerinin aktivitesini değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu inhibitör, mutant KRAS proteinine güçlü, seçici ve kovalent bir bağlanma sergilemiş ve in vitro olarak KRAS aracılı sinyalleşmeyi ve tümör hücresi çoğalmasını bastırmıştır. Bu hücre hattı, ASP2453'ün önemli ölçüde tümör gerilemesi sağladığı ksenograft modellerinde de kullanılmıştır. Bu etki, yeni KRAS inhibitörlerinin terapötik potansiyelini ve mekanizmalarını anlamada NCI-H1373'ün yararını vurgulamaktadır.

Ek olarak, NCI-H1373, PARP7 inhibitörlerine karşı direnç mekanizmalarını araştırmak amacıyla genom çapında CRISPR nakavt taramalarında kullanılmıştır. Sonuçlar, aril hidrokarbon reseptörü (AHR) sinyal yolunun kaybının PARP7 inhibisyonuna karşı dirençle ilişkili olduğunu ortaya koymuş ve potansiyel kombinasyon stratejilerine işaret etmiştir. Bu tür çalışmalar, direnç yolaklarının tanımlanmasında ve KRAS G12C mutasyonlu NSCLC için hedefe yönelik tedavilerin optimize edilmesinde bu hücre hattının rolünü göstermektedir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H1373 (Cytion katalog numarası 305597)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigot; Mutasyon: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
56 yıl
Etnik köken
Afro-Amerikan