NCI-H1373

Linia komórkowa NCI-H1373 stanowi model ludzkiego niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) zawierający mutację KRAS G12C, która często wiąże się z onkogenezą w przypadku gruczolakoraka płuca. Mutacja ta powoduje konstytutywną aktywację dalszych szlaków sygnałowych, takich jak szlak kinazy białkowej aktywowanej mitogenem (MAPK) oraz szlak kinazy fosfoinozytido-3 (PI3K), co sprzyja proliferacji i przetrwaniu nowotworu. Linia NCI-H1373 jest szeroko wykorzystywana w badaniach naukowych do oceny skuteczności nowych środków terapeutycznych ukierunkowanych na mutację KRAS G12C i powiązane szlaki onkogeniczne.

W badaniach przedklinicznych NCI-H1373 wykorzystywano do oceny aktywności nowych inhibitorów KRAS G12C, takich jak ASP2453. Inhibitor ten wykazał silne, selektywne i kowalencyjne wiązanie z zmutowanym białkiem KRAS, hamując sygnalizację za pośrednictwem KRAS oraz proliferację komórek nowotworowych in vitro. Linia komórkowa została również wykorzystana w modelach przeszczepów heterogenicznych, w których ASP2453 wywołał znaczną regresję nowotworu. Ta aktywność podkreśla przydatność NCI-H1373 w zrozumieniu potencjału terapeutycznego i mechanizmów działania nowych inhibitorów KRAS.

Ponadto linia NCI-H1373 została wykorzystana w badaniach przesiewowych z wyłączeniem genów metodą CRISPR w skali całego genomu w celu zbadania mechanizmów oporności na inhibitory PARP7. Wyniki wykazały, że utrata sygnalizacji receptora arylowo-węglowodorowego (AHR) wiąże się z opornością na hamowanie PARP7, co sugeruje potencjalne strategie leczenia skojarzonego. Badania te pokazują rolę tej linii komórkowej w identyfikacji szlaków oporności oraz optymalizacji terapii celowanych w przypadku NSCLC z mutacją KRAS G12C.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym