Gå direkt till innehållet
NCI-H1373
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
H1373, H-1373, NCIH1373

NCI-H1373

Cell line · Produktnummer 305597

Cellinjen NCI-H1373 är en modell för icke-småcellig lungcancer (NSCLC) hos människa som bär på KRAS G12C-mutationen, vilken ofta förknippas med onkog...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen NCI-H1373 är en modell för icke-småcellig lungcancer (NSCLC) hos människa som bär på KRAS G12C-mutationen, vilken ofta förknippas med tumörbildning vid lungadenokarcinom. Denna mutation leder till en konstant aktivering av nedströms signalvägar, såsom de mitogenaktiverade proteinkinaserna (MAPK) och fosfoinositid-3-kinaserna (PI3K), vilket driver tumörens tillväxt och överlevnad. NCI-H1373 används i stor utsträckning inom forskningen för att utvärdera effekten av nya läkemedel riktade mot KRAS G12C och relaterade onkogena signalvägar.

I prekliniska studier har NCI-H1373 använts för att bedöma aktiviteten hos nya KRAS G12C-hämmare, såsom ASP2453. Denna hämmare visade sig ha en potent, selektiv och kovalent bindning till det muterade KRAS-proteinet, vilket hämmade KRAS-medierad signalering och tumörcellernas proliferation in vitro. Cellinjen har även använts i xenotransplantatmodeller, där ASP2453 inducerade en signifikant tumörregression. Denna aktivitet understryker NCI-H1373:s betydelse för att förstå den terapeutiska potentialen och mekanismerna hos nya KRAS-hämmare.

Dessutom har NCI-H1373 använts i genomomfattande CRISPR-knockout-screeningar för att undersöka mekanismerna bakom resistens mot PARP7-hämmare. Resultaten visade att förlust av signalering via arylhydrokarbonreceptorn (AHR) är förknippad med resistens mot PARP7-hämning, vilket tyder på möjliga kombinationsstrategier. Sådana studier visar cellinens roll i identifieringen av resistensvägar och optimeringen av riktade terapier för KRAS G12C-muterad icke-småcellig lungcancer (NSCLC).

Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
NCI-H1373 (Cytion-katalognummer 305597)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozygot; Mutation: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med TrypLE Express, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
56 år
Etnicitet
Afroamerikan