Pāriet uz saturu
NCI-H1373
Audums
Plaušas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
H1373, H-1373, NCIH1373

Dokumenti

NCI-H1373

Cell line · Preces numurs 305597

Šūnu līnija NCI-H1373 ir cilvēka nesīkšūnu plaušu karcinomas (NSCLC) modelis, kurā ir KRAS G12C mutācija, kas bieži saistīta ar onkogēniem...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija NCI-H1373 ir cilvēka nesīkšūnu plaušu karcinomas (NSCLC) modelis, kurā ir KRAS G12C mutācija, kas bieži saistīta ar onkogēnēzi plaušu adenokarcinomā. Šī mutācija izraisa tālāk esošo signālceļu, piemēram, mitogēnu aktivētās proteīnu kināzes (MAPK) un fosfoinozitīda 3-kināzes (PI3K) ceļu, konstitutīvu aktivāciju, veicinot audzēja proliferāciju un izdzīvošanu. NCI-H1373 tiek plaši izmantota pētījumos, lai novērtētu jaunu terapeitisko līdzekļu efektivitāti, kas vērsti pret KRAS G12C un saistītajiem onkogēnajiem signālceļiem.

Pirmsklīniskajos pētījumos NCI-H1373 ir izmantots, lai novērtētu jauno KRAS G12C inhibitoru, piemēram, ASP2453, aktivitāti. Šis inhibitors parādīja spēcīgu, selektīvu un kovalentu saistīšanos ar mutēto KRAS proteīnu, in vitro nomācot KRAS-mediēto signālu pārraidi un audzēja šūnu proliferāciju. Šo šūnu līniju izmantoja arī ksenotransplantātu modeļos, kur ASP2453 izraisīja ievērojamu audzēja regresiju. Šī aktivitāte uzsver NCI-H1373 lietderību, lai izprastu jauno KRAS inhibitoru terapeitisko potenciālu un darbības mehānismus.

Turklāt NCI-H1373 ir izmantota genoma mēroga CRISPR izslēgšanas skrīningos, lai izpētītu rezistences mehānismus pret PARP7 inhibitoriem. Rezultāti atklāja, ka arilhidrokarbonu receptora (AHR) signālceļa zudums ir saistīts ar rezistenci pret PARP7 inhibīciju, kas liecina par iespējamām kombinēto terapiju stratēģijām. Šādi pētījumi parāda šīs šūnu līnijas nozīmi rezistences ceļu identificēšanā un mērķtiecīgu terapiju optimizēšanā KRAS G12C mutācijas nesējiem ar neplaušu mazšūnu vēzi (NSCLC).

Audums
Plaušas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H1373 (Cytion kataloga numurs 305597)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigota; Mutācija: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
56 gadi
Etniskā piederība
Afroamerikānis