Skip to content
NCI-H1373
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
H1373, H-1373, NCIH1373

Documents

NCI-H1373

Cell line · Product number 305597

The NCI-H1373 cell line is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) model harboring the KRAS G12C mutation, which is frequently associated with oncog...

US$540.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NCI-H1373 הוא מודל של קרצינומה של ריאה מסוג תאים לא קטנים (NSCLC) בבני אדם, הנושא את המוטציה KRAS G12C, הקשורה לעתים קרובות לתהליך היווצרות הגידול באדנוקרצינומה של הריאה. מוטציה זו גורמת להפעלה מתמדת של מסלולי איתות במורד הזרם, כגון מסלולי קינאז החלבון המופעל על ידי מיטוגן (MAPK) וקינאז פוספואינוזיטיד 3 (PI3K), המניעים את התפשטות הגידול והישרדותו. קו התאים NCI-H1373 נמצא בשימוש נרחב במחקר להערכת היעילות של חומרים טיפוליים חדשים המכוונים נגד KRAS G12C ומסלולי אונקוגנזה קשורים.

במחקרים פרה-קליניים נעשה שימוש ב-NCI-H1373 להערכת הפעילות של מעכבי KRAS G12C חדשים, כגון ASP2453. מעכב זה הפגין קישור חזק, סלקטיבי וקובלנטי לחלבון KRAS המוטנטי, ובכך דיכא את האיתות המתווך על ידי KRAS ואת התרבות תאי הגידול במבחנה. קו התאים שימש גם במודלים של שתלים זרים (xenograft), שבהם ASP2453 גרם לנסיגה משמעותית של הגידול. פעילות זו מדגישה את התועלת של NCI-H1373 בהבנת הפוטנציאל הטיפולי והמנגנונים של מעכבי KRAS חדשים.

בנוסף, NCI-H1373 שימש במסכי נוקאאוט CRISPR בגנום כולו כדי לחקור מנגנוני עמידות למעכבי PARP7. התוצאות חשפו כי אובדן האיתות של קולטן האריל-הידרוקרבון (AHR) קשור לעמידות בפני עיכוב PARP7, מה שמרמז על אסטרטגיות שילוב פוטנציאליות. מחקרים אלה מדגימים את תפקידו של קו התאים בזיהוי מסלולי עמידות ובאופטימיזציה של טיפולים ממוקדים עבור NSCLC עם מוטציה ב-KRAS G12C.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
NCI-H1373 (מספר קטלוג Cytion 305597)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), הומוזיגוטית; מוטציה: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), הומוזיגוטית

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-TrypLE Express, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים באינקובציה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר האינקובציה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
56 שנים
Ethnicity
אפרו-אמריקאי