NCI-H1373

A linhagem celular NCI-H1373 é um modelo de carcinoma pulmonar de células não pequenas (NSCLC) humano portador da mutação KRAS G12C, frequentemente associada à oncogênese no adenocarcinoma de pulmão. Essa mutação resulta na ativação constitutiva de vias de sinalização a jusante, como as vias da proteína quinase ativada por mitógeno (MAPK) e da fosfoinositida 3-quinase (PI3K), impulsionando a proliferação e a sobrevivência do tumor. A linha celular NCI-H1373 é amplamente utilizada em pesquisas para avaliar a eficácia de novos agentes terapêuticos direcionados ao KRAS G12C e às vias oncogênicas relacionadas.

Em estudos pré-clínicos, o NCI-H1373 tem sido empregado para avaliar a atividade de inibidores emergentes do KRAS G12C, como o ASP2453. Esse inibidor demonstrou ligação potente, seletiva e covalente à proteína KRAS mutante, suprimindo a sinalização mediada pelo KRAS e a proliferação de células tumorais in vitro. A linhagem celular também foi utilizada em modelos de xenoenxertos, nos quais o ASP2453 induziu regressão tumoral significativa. Essa atividade ressalta a utilidade do NCI-H1373 na compreensão do potencial terapêutico e dos mecanismos de novos inibidores de KRAS.

Além disso, a NCI-H1373 tem sido utilizada em triagens de nocaute CRISPR em todo o genoma para explorar mecanismos de resistência aos inibidores de PARP7. Os resultados revelaram que a perda da sinalização do receptor de hidrocarbonetos arílicos (AHR) está associada à resistência à inibição da PARP7, sugerindo possíveis estratégias de combinação. Tais estudos demonstram o papel da linhagem celular na identificação de vias de resistência e na otimização de terapias direcionadas para o NSCLC com mutação KRAS G12C.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.