Preskoči na vsebino
NCI-H1373
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
H1373, H-1373, NCIH1373

Dokumenti

NCI-H1373

Cell line · Številka izdelka 305597

Celična linija NCI-H1373 je model človeškega nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), ki nosi mutacijo KRAS G12C, ki je pogosto povezana z onkog...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija NCI-H1373 je model človeškega nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), ki nosi mutacijo KRAS G12C, ki je pogosto povezana z onkogenezo pri pljučnem adenokarcinomu. Ta mutacija povzroča konstitutivno aktivacijo signalnih poti v nadaljevanju, kot sta pot mitogen-aktivirane proteinske kinaze (MAPK) in fosfoinozitid-3-kinaze (PI3K), kar spodbuja proliferacijo in preživetje tumorja. NCI-H1373 se v raziskavah obsežno uporablja za ocenjevanje učinkovitosti novih terapevtskih sredstev, usmerjenih v KRAS G12C in povezane onkogene poti.

V predkliničnih študijah je bil NCI-H1373 uporabljen za oceno aktivnosti novih zaviralcev KRAS G12C, kot je ASP2453. Ta zaviralec je pokazal močno, selektivno in kovalentno vezavo na mutantni protein KRAS, s čimer je in vitro zaviral signalizacijo, posredovano s KRAS, in proliferacijo tumorskih celic. Celična linija je bila uporabljena tudi v modelih ksenotransplantatov, kjer je ASP2453 povzročil znatno regresijo tumorja. Ta aktivnost poudarja uporabnost NCI-H1373 pri razumevanju terapevtskega potenciala in mehanizmov delovanja novih zaviralcev KRAS.

Poleg tega je bila linija NCI-H1373 uporabljena v presejalnih testih z izklopom genov po celotnem genomu s tehnologijo CRISPR za raziskovanje mehanizmov odpornosti proti zaviralcem PARP7. Rezultati so pokazali, da je izguba signalizacije aril-hidrokarbonnega receptorja (AHR) povezana z odpornostjo proti zaviranju PARP7, kar nakazuje možne strategije kombiniranega zdravljenja. Takšne študije dokazujejo vlogo te celične linije pri prepoznavanju poti odpornosti in optimizaciji ciljnih terapij za NSCLC z mutacijo KRAS G12C.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H1373 (kataloška številka Cytion 305597)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homozigotna; Mutacija: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
56 let
Etnična pripadnost
Afroameričan