Mine otse sisu juurde
NCI-H1373
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
H1373, H-1373, NCIH1373

Dokumendid

NCI-H1373

Cell line · Toote number 305597

Rakuliin NCI-H1373 on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) mudel, milles esineb KRAS G12C-mutatsioon, mida seostatakse sageli onkogeeniga...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin NCI-H1373 on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) mudel, milles esineb KRAS G12C-mutatsioon, mida seostatakse sageli kopsuadenokartsinoomi tekkega. See mutatsioon põhjustab allavoolu signaaliteede, nagu mitogeeni poolt aktiveeritud proteiinkinaasi (MAPK) ja fosfoinositiid-3-kinaasi (PI3K) signaaliteede, konstitutiivset aktiveerumist, soodustades kasvajate proliferatsiooni ja ellujäämist. NCI-H1373-i kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes, et hinnata KRAS G12C-d ja sellega seotud onkogeenseid signaalradasid sihtivate uute ravimite efektiivsust.

Prekliinilistes uuringutes on NCI-H1373-t kasutatud uute KRAS G12C inhibiitorite, nagu ASP2453, aktiivsuse hindamiseks. See inhibiitor näitas tugevat, selektiivset ja kovalentset seondumist mutatsiooniga KRAS-valguga, pärssides in vitro KRAS-vahendatud signaaliedastust ja kasvajarakkude proliferatsiooni. Seda rakuliini kasutati ka ksenotransplantaadi mudelites, kus ASP2453 põhjustas märkimisväärset kasvaja taandumist. See toime rõhutab NCI-H1373 kasulikkust uute KRAS-inhibiitorite ravipotentsiaali ja toimemehhanismide mõistmisel.

Lisaks on NCI-H1373-t kasutatud genoomiülestes CRISPR-knockout-sõelumistes, et uurida PARP7-inhibiitorite suhtes resistentsuse mehhanisme. Tulemused näitasid, et arüülhüdrokarbonaadi retseptori (AHR) signaalimise kadumine on seotud resistentsusega PARP7-inhibiitorite suhtes, mis viitab võimalikele kombinatsioonistrateegiatele. Sellised uuringud näitavad rakuliini rolli resistentsusradade kindlakstegemisel ja KRAS G12C-mutatsiooniga mitteväikerakk-kopsuvähi sihtterapiate optimeerimisel.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • H1373
  • H-1373
  • NCIH1373

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
NCI-H1373 (Cytioni katalooginumber 305597)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1465

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Cys (c.34G>T), homosügootne; Mutatsioon: TP53, p.Pro47Leu (c.140C>T), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat
Etniline kuuluvus
Afroameeriklane