PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 es una línea celular derivada de una metástasis peritoneal de un carcinoma ovárico seroso de bajo grado (LGSOC). Esta línea celular se estableció como parte de un modelo de investigación integral que también incluía un xenoinjerto derivado de paciente (PDX). La creación de PM-LGSOC-01 implicó un injerto ortotópico mediante la inyección de una suspensión tumoral subperitoneal en ratones SCID/Beige, lo que dio lugar a un modelo PDX de metástasis peritoneal (PM) trasplantable en etapa temprana. El análisis histológico confirmó que tanto las células del PM-PDX como las de PM-LGSOC-01 conservaban los patrones de crecimiento micropapilar y cribriforme típicos del LGSOC, con brotes tumorales y la expresión de marcadores como PAX8 y WT1. El análisis genético reveló que el tumor primario, la PM y la línea celular comparten una mutación KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), lo que hace que este modelo sea relevante para estudiar la progresión del LGSOC y la respuesta al tratamiento, particularmente en relación con la vía MAPK.

La PM-LGSOC-01 presenta características clave relevantes para la investigación preclínica. Tiene un tiempo de duplicación de aproximadamente 42 horas en los primeros pases, el cual disminuyó a 23 horas en etapas posteriores del cultivo celular, y se ha mantenido durante más de 100 pases in vitro. La línea celular presenta una morfología epitelial con organización de tipo epitelial y una alta adhesión célula-célula. Sin embargo, muestra una respuesta limitada a la quimioterapia a base de platino, pero es altamente sensible al paclitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Además, la PM-LGSOC-01 es particularmente sensible al inhibidor de MEK trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), tanto in vitro como in vivo, lo que refleja el impacto de la mutación del gen KRAS en las respuestas terapéuticas.

El PM-LGSOC-01 sirve como una herramienta valiosa para investigar el LGSOC, particularmente en el contexto de la resistencia a los medicamentos, la tumorigenicidad y la sensibilidad a terapias dirigidas como los inhibidores de MEK. Su uso en el desarrollo de enfoques de tratamiento personalizados para el carcinoma ovárico seroso de bajo grado es fundamental, dada la escasa respuesta del LGSOC a la quimioterapia convencional en comparación con el carcinoma ovárico seroso de alto grado (HGSOC).

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.