Skip to content
PM-LGSOC-01
Tissue
รังไข่
Disease
มะเร็งรังไข่ชนิดเซอรัสชนิดต่ำ
Metastatic site
เยื่อบุช่องท้อง
Synonyms
M28/2

Documents

PM-LGSOC-01

Cell line · Product number 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

PM-LGSOC-01 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ได้มาจากมะเร็งเยื่อบุช่องท้องที่มีการแพร่กระจายของมะเร็งรังไข่ชนิดเซอรัสเกรดต่ำ (LGSOC) สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นเป็นส่วนหนึ่งของโมเดลการวิจัยที่ครอบคลุมซึ่งรวมถึง PDX ที่ได้จากผู้ป่วยด้วยการสร้าง PM-LGSOC-01 เกี่ยวข้องกับการปลูกถ่ายอวัยวะแบบออร์โธโทปิกผ่านการฉีดสารละลายเนื้องอกใต้เยื่อบุช่องท้องในหนู SCID/Beige ซึ่งนำไปสู่การสร้างแบบจำลองการแพร่กระจายของมะเร็งในช่องท้อง (PM)-PDX ในระยะเริ่มต้นที่สามารถปลูกถ่ายได้การวิเคราะห์ทางจุลพยาธิวิทยาได้ยืนยันว่าทั้งเซลล์ PM-PDX และ PM-LGSOC-01 ยังคงรูปแบบการเจริญเติบโตแบบไมโครปาพิลลารีและคริบริฟอร์มซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของ LGSOC พร้อมกับการเกิดก้อนเนื้องอกใหม่ (tumor budding) และการแสดงออกของตัวบ่งชี้เช่น PAX8 และ WT1การวิเคราะห์ทางพันธุกรรมแสดงให้เห็นว่าเนื้องอกหลัก (PM) และสายเซลล์มีการกลายพันธุ์ KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val) ร่วมกัน ทำให้โมเดลนี้มีความเกี่ยวข้องกับการศึกษาการลุกลามและการตอบสนองต่อการรักษาของ LGSOC โดยเฉพาะอย่างยิ่งในความสัมพันธ์กับเส้นทาง MAPK

PM-LGSOC-01 แสดงลักษณะสำคัญที่เกี่ยวข้องกับการวิจัยก่อนคลินิก โดยมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 42 ชั่วโมงในช่วงแรกของการเพาะเลี้ยงเซลล์ ซึ่งลดลงเหลือ 23 ชั่วโมงในระยะหลังของการเพาะเลี้ยงเซลล์ และยังคงรักษาไว้ได้มากกว่า 100 ครั้งในการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง สายพันธุ์เซลล์นี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวที่มีการจัดเรียงแบบเยื่อบุผิวและมีความยึดเกาะระหว่างเซลล์สูงอย่างไรก็ตาม แสดงการตอบสนองที่จำกัดต่อการรักษาด้วยเคมีบำบัดที่มีแพลทินัมเป็นฐาน แต่มีความไวสูงต่อแพคลิแทกเซล (IC50: 6.3 ± 2.2 nM) นอกจากนี้ PM-LGSOC-01 ยังมีความไวเป็นพิเศษต่อตัวยับยั้ง MEK คือ trametinib (IC50: 7.2 ± 0.5 nM) ทั้งในหลอดทดลองและในสิ่งมีชีวิต ซึ่งสะท้อนถึงผลกระทบของการกลายพันธุ์ KRAS ต่อการตอบสนองต่อการรักษา

PM-LGSOC-01 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการตรวจสอบ LGSOC โดยเฉพาะในบริบทของการดื้อยา การเกิดเนื้องอก และความไวต่อการรักษาแบบมุ่งเป้า เช่น ยายับยั้ง MEK การใช้เครื่องมือนี้ในการพัฒนาแนวทางการรักษาเฉพาะบุคคลสำหรับมะเร็งรังไข่ชนิดซีเรียสเกรดต่ำมีความสำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจาก LGSOC มีการตอบสนองต่อเคมีบำบัดแบบดั้งเดิมได้น้อยกว่ามะเร็งรังไข่ชนิดซีเรียสเกรดสูง (HGSOC)

Tissue
รังไข่
Disease
มะเร็งรังไข่ชนิดเซอรัสชนิดต่ำ
Metastatic site
เยื่อบุช่องท้อง
Synonyms
  • M28/2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Doubling time
42 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
PM-LGSOC-01 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300305)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์ KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
60 ปี