Skip to content
PM-LGSOC-01
Tissue
שחלה
Disease
קרצינומה של השחלה בדרגה נמוכה
Metastatic site
צפק
Synonyms
M28/2

Documents

PM-LGSOC-01

Cell line · Product number 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

PM-LGSOC-01 הוא קו תאים שמקורו בגרורות פריטונאליות של קרצינומה סרוזית של השחלה בדרגה נמוכה (LGSOC). קו תאים זה הוקם כחלק ממודל מחקר מקיף שכלל גם שתל זר שמקורו בחולה (PDX). יצירת PM-LGSOC-01 כללה השתלה אורתוטופית באמצעות הזרקת תאי גידול תת-צפקית בעכברי SCID/Beige, מה שהוביל למודל PDX של גרורות צפקית (PM) הניתנת להשתלה בשלב מוקדם. ניתוח היסטולוגי אישר כי תאי PM-PDX ו-PM-LGSOC-01 שמרו על דפוסי הצמיחה המיקרו-פפילריים והקריבריפורמיים האופייניים ל-LGSOC, עם התפתחות גידולים וביטוי של סמנים כגון PAX8 ו-WT1. ניתוח גנטי הראה כי הגידול הראשוני, ה-PM, וקו התאים חולקים מוטציה KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), מה שהופך מודל זה לרלוונטי לחקר התקדמות LGSOC ותגובה לטיפול, במיוחד ביחס למסלול MAPK.

PM-LGSOC-01 מציג מאפיינים מרכזיים הרלוונטיים למחקר פרה-קליני. זמן הכפלתו הוא כ-42 שעות במעברים המוקדמים, אשר פחת ל-23 שעות בשלבים מאוחרים יותר של תרבית התאים, ונשמר לאורך למעלה מ-100 מעברים במבחנה. קו התאים מפגין מורפולוגיה אפיתלית עם ארגון דמוי אפיתל והדבקה גבוהה בין תאים. עם זאת, הוא מראה תגובה מוגבלת לכימותרפיה מבוססת פלטינה, אך הוא רגיש מאוד לפקליטקסל (IC50: 6.3 ± 2.2 nM). בנוסף, PM-LGSOC-01 רגיש במיוחד למעכב MEK trametinib (IC50: 7.2 ± 0.5 nM), הן במבחנה והן in vivo, מה שמשקף את ההשפעה של מוטציית KRAS על התגובות הטיפוליות.

PM-LGSOC-01 משמש ככלי חשוב לחקר LGSOC, במיוחד בהקשר של עמידות לתרופות, יכולת גידולי ו רגישות לטיפולים ממוקדים כמו מעכבי MEK. השימוש בו בפיתוח גישות טיפול מותאמות אישית לסרטן השחלות הסרוזי בדרגה נמוכה הוא קריטי, לאור התגובה הלקויה של LGSOC לכימותרפיה קונבנציונלית בהשוואה לסרטן השחלות הסרוזי בדרגה גבוהה (HGSOC).

Tissue
שחלה
Disease
קרצינומה של השחלה בדרגה נמוכה
Metastatic site
צפק
Synonyms
  • M28/2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Doubling time
42 שעות

04Identifiers

Citation
PM-LGSOC-01 (מספר קטלוגי Cytion 300305)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
60 שנים