Prejsť na obsah
PM-LGSOC-01
Tkanivo
Vaječník
Choroba
Nízkostupňový serózny karcinóm ovária
Miesto metastáz
Peritoneum
Synonymá
M28/2

Dokumenty

PM-LGSOC-01

Cell line · Číslo výrobku 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

PM-LGSOC-01 je bunková línia odvodená z peritoneálnych metastáz serózneho karcinómu vaječníkov nízkeho stupňa (LGSOC). Táto bunková línia bola vytvorená ako súčasť komplexného výskumného modelu, ktorý zahŕňal aj xenotransplantát odvodený od pacienta (PDX). Vytvorenie PM-LGSOC-01 zahŕňalo ortotopické prirastenie prostredníctvom subperitoneálnej injekcie nádorovej suspenzie do myší SCID/Beige, čo viedlo k vytvoreniu modelu včasného štádia transplantovateľných peritoneálnych metastáz (PM)-PDX. Histologická analýza potvrdila, že bunky PM-PDX aj PM-LGSOC-01 si zachovali mikropapilárne a kribriformné rastové vzory typické pre LGSOC s nádorovým pučaním a expresiou markerov, ako sú PAX8 a WT1. Genetická analýza ukázala, že primárny nádor, PM a bunková línia majú spoločnú mutáciu KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), vďaka čomu je tento model vhodný na štúdium progresie LGSOC a odpovede na liečbu, najmä vo vzťahu k dráhe MAPK.

PM-LGSOC-01 vykazuje kľúčové vlastnosti dôležité pre predklinický výskum. Má zdvojovací čas približne 42 hodín v skorých pasážach, ktorý sa v neskorších štádiách bunkovej kultúry skrátil na 23 hodín, a udržiava sa viac ako 100 pasáží in vitro. Bunková línia vykazuje epitelovú morfológiu s organizáciou podobnou epitelu a vysokou adhéziou buniek. Vykazuje však obmedzenú odpoveď na chemoterapiu na báze platiny, ale je vysoko citlivá na paklitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Okrem toho je PM-LGSOC-01 obzvlášť citlivý na inhibítor MEK trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), a to in vitro aj in vivo, čo odráža vplyv mutácie KRAS na terapeutickú odpoveď.

PM-LGSOC-01 slúži ako cenný nástroj na skúmanie LGSOC, najmä v kontexte liekovej rezistencie, nádorovosti a citlivosti na cielené terapie, ako sú inhibítory MEK. Jeho použitie pri vývoji personalizovaných liečebných prístupov pre low-grade serózny karcinóm ovária je veľmi dôležité vzhľadom na slabú reakciu LGSOC na konvenčnú chemoterapiu v porovnaní s high-grade seróznym karcinómom ovária (HGSOC).

Tkanivo
Vaječník
Choroba
Nízkostupňový serózny karcinóm ovária
Miesto metastáz
Peritoneum
Synonymá
  • M28/2

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Doba zdvojnásobenia
42 hodín

04Identifikátory

Citácia
PM-LGSOC-01 (katalógové číslo Cytion 300305)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
60 rokov