PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 è una linea cellulare derivata da metastasi peritoneali di un carcinoma ovarico sieroso di basso grado (LGSOC). Questa linea cellulare è stata creata come parte di un modello di ricerca completo che comprendeva anche uno xenotrapianto derivato da paziente (PDX). La creazione di PM-LGSOC-01 ha comportato l'innesto ortotopico tramite iniezione di liquame tumorale sottoperitoneale in topi SCID/Beige, portando a un modello di metastasi peritoneale trapiantabile (PM)-PDX allo stadio iniziale. L'analisi istologica ha confermato che sia le cellule PM-PDX che quelle PM-LGSOC-01 hanno mantenuto i modelli di crescita micropapillare e cririforme tipici di LGSOC, con gemmazione tumorale ed espressione di marcatori come PAX8 e WT1. L'analisi genetica ha mostrato che il tumore primario, il PM e la linea cellulare condividono una mutazione KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), rendendo questo modello rilevante per lo studio della progressione di LGSOC e della risposta al trattamento, in particolare in relazione alla via MAPK.

PM-LGSOC-01 presenta caratteristiche fondamentali per la ricerca preclinica. Ha un tempo di raddoppiamento di circa 42 ore nei primi passaggi, che è sceso a 23 ore nelle fasi successive della coltura cellulare, ed è stata mantenuta per oltre 100 passaggi in vitro. La linea cellulare dimostra una morfologia epiteliale con un'organizzazione simile a quella epiteliale e un'elevata adesione cellula-cellula. Tuttavia, mostra una risposta limitata alla chemioterapia a base di platino, ma è altamente sensibile al paclitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Inoltre, PM-LGSOC-01 è particolarmente sensibile all'inibitore MEK trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), sia in vitro che in vivo, riflettendo l'impatto della mutazione KRAS sulle risposte terapeutiche.

PM-LGSOC-01 è uno strumento prezioso per studiare LGSOC, in particolare nel contesto della resistenza ai farmaci, della tumorigenicità e della sensibilità alle terapie mirate come gli inibitori MEK. Il suo utilizzo nello sviluppo di approcci terapeutici personalizzati per il carcinoma ovarico sieroso di basso grado è fondamentale, data la scarsa reattività dell'LGSOC alla chemioterapia convenzionale rispetto al carcinoma ovarico sieroso di alto grado (HGSOC).

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia