Gå direkt till innehållet
PM-LGSOC-01
Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Låggradigt seröst ovariecarcinom
Metastaseringsställe
Bukhinnan (peritoneum)
Synonymer
M28/2

PM-LGSOC-01

Cell line · Produktnummer 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

PM-LGSOC-01 är en cellinje som härrör från peritoneal metastasering av ett låggradigt seröst ovariecarcinom (LGSOC). Denna cellinje etablerades som en del av en omfattande forskningsmodell som även inkluderade en patientderiverad xenograft (PDX). PM-LGSOC-01 skapades genom ortotopisk inplantering via subperitoneal injektion av tumörslam i SCID/Beige-möss, vilket ledde till en PDX-modell med transplanterbar peritoneal metastas (PM) i ett tidigt stadium. Histologisk analys bekräftade att både PM-PDX- och PM-LGSOC-01-cellerna hade kvar de mikropapillära och cribriforma tillväxtmönster som är typiska för LGSOC, med tumörknoppning och uttryck av markörer som PAX8 och WT1. Genetisk analys visade att den primära tumören, PM och cellinjen delar en KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val)-mutation, vilket gör denna modell relevant för att studera LGSOC-progression och behandlingssvar, särskilt i relation till MAPK-vägen.

PM-LGSOC-01 uppvisar viktiga egenskaper som är relevanta för preklinisk forskning. Den har en fördubblingstid på cirka 42 timmar i tidiga passager, som minskade till 23 timmar i senare stadier av cellodling, och har bibehållits i över 100 in vitro-passager. Cellinjen uppvisar en epitelial morfologi med epitelliknande organisation och hög cell-celladhesion. Den visar dock begränsad respons på platinabaserad kemoterapi men är mycket känslig för paklitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Dessutom är PM-LGSOC-01 särskilt känslig för MEK-hämmaren trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), både in vitro och in vivo, vilket återspeglar KRAS-mutationens inverkan på behandlingssvaret.

PM-LGSOC-01 är ett värdefullt verktyg för att undersöka LGSOC, särskilt i samband med läkemedelsresistens, tumörbildning och känslighet för riktade terapier som MEK-hämmare. Dess användning för att utveckla individanpassade behandlingsmetoder för låggradig serös ovarialcancer är avgörande, med tanke på att LGSOC svarar dåligt på konventionell kemoterapi jämfört med höggradig serös ovarialcancer (HGSOC).

Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Låggradigt seröst ovariecarcinom
Metastaseringsställe
Bukhinnan (peritoneum)
Synonymer
  • M28/2

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Fördubblingstid
42 timmar

04Identifierare

Källa
PM-LGSOC-01 (Cytion katalognummer 300305)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))-mutation

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
60 år