
- Kude
- Munasarjad
- Haigus
- Madala astme seroosne munasarjakartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Peritoneum
- Sünonüümid
- M28/2
Dokumendid
PM-LGSOC-01
Cell line · Toote number 300305
PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...
Kohandamine / Soovitused
- PM-LGSOC-01Cell line€800.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
PM-LGSOC-01 on rakuliin, mis on saadud madala seroosse munasarjakartsinoomi (LGSOC) peritoneaalsetest metastaasidest. See rakuliin loodi osana terviklikust uurimismudelist, mis hõlmas ka patsiendist saadud ksenotransplantaati (PDX). PM-LGSOC-01 loomine hõlmas ortotoopilist siirdamist subperitoneaalse kasvajapudeli süstimise teel SCID/Beige hiirtesse, mis viis varajases staadiumis siirdatava peritoneaalse metastaasi (PM)-PDX-mudeli tekkimiseni. Histoloogiline analüüs kinnitas, et nii PM-PDX kui ka PM-LGSOC-01 rakud säilitasid LGSOC-le iseloomulikud mikropapillaarsed ja ribriformsed kasvumustrid, koos kasvajate pungistumisega ja selliste markerite nagu PAX8 ja WT1 ekspressiooniga. Geneetiline analüüs näitas, et primaarsel kasvajal, PM-il ja rakuliinil on ühine KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val) mutatsioon, mis muudab selle mudeli asjakohaseks LGSOC-i progresseerumise ja ravivastuse uurimiseks, eriti seoses MAPK-radaga.
PM-LGSOC-01 omab prekliiniliste uuringute jaoks olulisi põhiomadusi. Selle kahekordistumisaeg on varajases faasis ligikaudu 42 tundi, mis vähenes 23 tunnini hilisemates rakukultuuride etappides, ja seda on säilitatud üle 100 in vitro faasi. Rakuliinil on epiteeli morfoloogia koos epiteeli sarnase organismi ja suure rakkude-rakkude adhesiivsusega. Siiski reageerib see piiratud määral plaatinapõhisele kemoteraapiale, kuid on väga tundlik paklitakseeli suhtes (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Lisaks on PM-LGSOC-01 eriti tundlik MEK-inhibiitori trametiniibi suhtes (IC50: 7,2 ± 0,5 nM) nii in vitro kui ka in vivo, mis näitab KRAS-mutatsiooni mõju ravivastusele.
PM-LGSOC-01 on väärtuslik vahend LGSOC-i uurimiseks, eriti ravimresistentsuse, kasvajalisuse ja tundlikkuse suhtes sihtotstarbeliste ravimeetodite, nagu MEK-inhibiitorid, kontekstis. Selle kasutamine madala seroosse munasarjakartsinoomi personaliseeritud ravimeetodite väljatöötamisel on kriitilise tähtsusega, arvestades LGSOC-i kehva tundlikkust tavapärase keemiaravi suhtes võrreldes kõrge seroosse munasarjakartsinoomiga (HGSOC).
- Kude
- Munasarjad
- Haigus
- Madala astme seroosne munasarjakartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Peritoneum
- Sünonüümid
- M28/2
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Kahekordistumisaeg
- 42 tundi
04Tunnused
- Viide
- PM-LGSOC-01 (Cytioni katalooginumber 300305)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_xx32
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Mutatsiooniprofiil
- KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val)) mutatsioon
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 1 x 104 rakku/cm2
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 60 aastat
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Kehtivad kolmandate osapooltega sõlmitud lepingud
- Jah