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PM-LGSOC-01
ティッシュ
卵巣
病気
低悪性度漿液性卵巣がん
転移部位
腹膜
同義語
M28/2

PM-LGSOC-01

Cell line · 製品番号 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

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01概要

説明

PM-LGSOC-01は、低悪性度漿液性卵巣がん(LGSOC)の腹膜転移に由来する細胞株である。この細胞株は、患者由来異種移植片(PDX)を含む包括的研究モデルの一部として樹立された。PM-LGSOC-01の作製には、SCID/Beigeマウスに腫瘍スラリーを腹膜下に注入することによる同所移植が用いられ、早期の移植可能腹膜転移(PM)-PDXモデルにつながった。組織学的解析では、PM-PDX細胞もPM-LGSOC-01細胞も、LGSOCに典型的な微小乳頭状および篩状増殖パターンを保持しており、腫瘍の出芽、PAX8やWT1などのマーカーの発現が確認された。遺伝子解析の結果、原発腫瘍、PM、細胞株はKRAS c.35 G > T(p.Gly12Val)変異を共有しており、このモデルは特にMAPK経路との関連において、LGSOCの進行と治療反応を研究するのに適している。

PM-LGSOC-01は、前臨床研究に関連する主要な特徴を示している。この細胞株は、継代初期には約42時間の倍加時間を有し、培養後期には23時間に減少し、100回以上のin vitro継代が維持されている。この細胞株は、上皮様組織と高い細胞間接着を有する上皮形態を示す。しかしながら、白金ベースの化学療法には限定的な反応を示すが、パクリタキセルには高い感受性を示す(IC50:6.3±2.2nM)。さらに、PM-LGSOC-01は、in vitroおよびin vivoの両方で、MEK阻害剤トラメチニブ(IC50:7.2±0.5 nM)に対して特に感受性が高く、これはKRAS変異が治療反応に及ぼす影響を反映している。

PM-LGSOC-01は、LGSOC、特に薬剤耐性、腫瘍原性、MEK阻害剤のような標的治療薬に対する感受性を調べるための貴重なツールである。高悪性度漿液性卵巣がん(HGSOC)と比較して、LGSOCの従来の化学療法に対する反応性が低いことを考えると、低悪性度漿液性卵巣がんに対する個別化治療アプローチの開発におけるPM-LGSOC-01の使用は極めて重要である。

ティッシュ
卵巣
病気
低悪性度漿液性卵巣がん
転移部位
腹膜
同義語
  • M28/2

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
倍増時間
42時間

04識別子

引用
PM-LGSOC-01(サイシオン カタログ番号 300305)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_xx32

05発現と感受性

変異プロファイル
KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val)) 遺伝子変異

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
60年