PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 je buněčná linie odvozená z peritoneální metastázy serózního karcinomu ovaria nízkého stupně (LGSOC). Tato buněčná linie byla vytvořena jako součást komplexního výzkumného modelu, který zahrnoval také xenograft odvozený od pacienta (PDX). Vytvoření PM-LGSOC-01 zahrnovalo ortotopické přihojení prostřednictvím subperitoneální injekce nádorové kaše u myší SCID/Beige, což vedlo k vytvoření modelu transplantovatelné peritoneální metastázy (PM)-PDX v raném stadiu. Histologická analýza potvrdila, že jak buňky PM-PDX, tak PM-LGSOC-01 si zachovaly mikropapilární a kribriformní růstový vzorec typický pro LGSOC, s nádorovými pupeny a expresí markerů, jako jsou PAX8 a WT1. Genetická analýza ukázala, že primární nádor, PM a buněčná linie sdílejí mutaci KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), což činí tento model relevantním pro studium progrese LGSOC a odpovědi na léčbu, zejména ve vztahu k dráze MAPK.

PM-LGSOC-01 vykazuje klíčové vlastnosti důležité pro preklinický výzkum. Jeho doba zdvojení je přibližně 42 hodin v raných pasážích, která se v pozdějších fázích buněčné kultivace snížila na 23 hodin, a byl udržován po více než 100 pasáží in vitro. Buněčná linie vykazuje epitelovou morfologii s uspořádáním podobným epitelu a vysokou adhezí buněk. Vykazuje však omezenou odpověď na chemoterapii založenou na platině, ale je vysoce citlivá na paklitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Kromě toho je PM-LGSOC-01 obzvláště citlivý na inhibitor MEK trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), a to jak in vitro, tak in vivo, což odráží vliv mutace KRAS na léčebnou odpověď.

PM-LGSOC-01 slouží jako cenný nástroj pro zkoumání LGSOC, zejména v kontextu lékové rezistence, tumorigenity a citlivosti na cílenou léčbu, jako jsou inhibitory MEK. Jeho využití při vývoji personalizovaných léčebných přístupů pro low-grade serózní karcinom ovaria je zásadní vzhledem k nízké citlivosti LGSOC na konvenční chemoterapii ve srovnání s high-grade serózním karcinomem ovaria (HGSOC).

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení