Μετάβαση στο περιεχόμενο
PM-LGSOC-01
Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Χαμηλού βαθμού ορώδες καρκίνωμα των ωοθηκών
Θέση μετάστασης
Περιτόναιο
Συνώνυμα
M28/2

Έγγραφα

PM-LGSOC-01

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η PM-LGSOC-01 είναι μια κυτταρική σειρά που προέρχεται από περιτοναϊκή μετάσταση ενός χαμηλού βαθμού ορώδους καρκινώματος των ωοθηκών (LGSOC). Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε ως μέρος ενός ολοκληρωμένου ερευνητικού μοντέλου που περιλάμβανε επίσης ένα ξενομόσχευμα προερχόμενο από ασθενή (PDX). Η δημιουργία του PM-LGSOC-01 περιελάμβανε ορθοτοπικό μόσχευμα μέσω υποπεριτοναϊκής έγχυσης πολτού όγκου σε ποντίκια SCID/Beige, οδηγώντας σε ένα μοντέλο μεταμοσχεύσιμης περιτοναϊκής μετάστασης (PM)-PDX σε πρώιμο στάδιο. Η ιστολογική ανάλυση επιβεβαίωσε ότι τόσο τα κύτταρα PM-PDX όσο και τα κύτταρα PM-LGSOC-01 διατήρησαν τα μικροθαλαμοειδή και τριχοειδή πρότυπα ανάπτυξης που είναι τυπικά για την LGSOC, με εκβλάστηση του όγκου και έκφραση δεικτών όπως οι PAX8 και WT1. Η γενετική ανάλυση έδειξε ότι ο πρωτοπαθής όγκος, το PM και η κυτταρική σειρά μοιράζονται μια μετάλλαξη KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), καθιστώντας αυτό το μοντέλο σχετικό με τη μελέτη της εξέλιξης και της θεραπευτικής ανταπόκρισης του LGSOC, ιδίως σε σχέση με το μονοπάτι MAPK.

Το PM-LGSOC-01 παρουσιάζει βασικά χαρακτηριστικά σχετικά με την προκλινική έρευνα. Έχει χρόνο διπλασιασμού περίπου 42 ωρών σε πρώιμα περάσματα, ο οποίος μειώθηκε σε 23 ώρες σε μεταγενέστερα στάδια κυτταροκαλλιέργειας, και έχει διατηρηθεί για πάνω από 100 in vitro περάσματα. Η κυτταρική σειρά επιδεικνύει επιθηλιακή μορφολογία με οργάνωση που μοιάζει με επιθήλιο και υψηλή προσκόλληση κυττάρου-κυττάρου. Ωστόσο, παρουσιάζει περιορισμένη ανταπόκριση στη χημειοθεραπεία με βάση την πλατίνα, αλλά είναι ιδιαίτερα ευαίσθητη στην πακλιταξέλη (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Επιπλέον, το PM-LGSOC-01 είναι ιδιαίτερα ευαίσθητο στον αναστολέα MEK trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), τόσο in vitro όσο και in vivo, γεγονός που αντανακλά την επίδραση της μετάλλαξης KRAS στις θεραπευτικές αποκρίσεις.

Το PM-LGSOC-01 χρησιμεύει ως πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση της LGSOC, ιδίως στο πλαίσιο της ανθεκτικότητας στα φάρμακα, της καρκινικότητας και της ευαισθησίας σε στοχευμένες θεραπείες όπως οι αναστολείς της MEK. Η χρήση του στην ανάπτυξη εξατομικευμένων θεραπευτικών προσεγγίσεων για το χαμηλού βαθμού ορώδες καρκίνωμα των ωοθηκών είναι κρίσιμη, δεδομένης της φτωχής ανταπόκρισης του LGSOC στη συμβατική χημειοθεραπεία σε σύγκριση με το υψηλού βαθμού ορώδες καρκίνωμα των ωοθηκών (HGSOC).

Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Χαμηλού βαθμού ορώδες καρκίνωμα των ωοθηκών
Θέση μετάστασης
Περιτόναιο
Συνώνυμα
  • M28/2

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Χρόνος διπλασιασμού
42 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
PM-LGSOC-01 (αριθμός καταλόγου Cytion 300305)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_xx32

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
60 χρόνια