Tartalomra ugrás
PM-LGSOC-01
Szövet
Petefészek
Betegség
Alacsony fokú serosus petefészek karcinóma
Áttétes hely
Peritoneum
Szinonimák
M28/2

Dokumentumok

PM-LGSOC-01

Cell line · Termékszám 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A PM-LGSOC-01 egy alacsony fokú szerózus petefészekrák (LGSOC) peritoneális metasztázisából származó sejtvonal. Ezt a sejtvonalat egy átfogó kutatási modell részeként hozták létre, amely egy betegből származó xenograftot (PDX) is tartalmazott. A PM-LGSOC-01 létrehozása ortotópos beültetéssel történt, SCID/Beige egerekbe szubperitoneális tumoriszap befecskendezéssel, ami egy korai stádiumban lévő transzplantálható peritoneális metasztázis (PM)-PDX modellhez vezetett. A szövettani elemzés megerősítette, hogy mind a PM-PDX, mind a PM-LGSOC-01 sejtek megtartották az LGSOC-ra jellemző mikropapilláris és cribriform növekedési mintázatot, a tumor bimbózásával és olyan markerek expressziójával, mint a PAX8 és a WT1. A genetikai elemzés kimutatta, hogy a primer tumor, a PM és a sejtvonal közös KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val) mutációval rendelkezik, így ez a modell releváns az LGSOC progressziójának és a kezelésre adott válasznak a tanulmányozására, különösen a MAPK útvonallal kapcsolatban.

A PM-LGSOC-01 a preklinikai kutatások szempontjából lényeges kulcsfontosságú tulajdonságokkal rendelkezik. A korai passzázsokban a duplázódási idő megközelítőleg 42 óra, ami a sejtkultúra későbbi szakaszaiban 23 órára csökkent, és több mint 100 in vitro passzázson keresztül tartható fenn. A sejtvonal epiteliális morfológiát mutat epitélszerű szerveződéssel és magas sejt-sejt adhézióval. Ugyanakkor korlátozott választ mutat a platina-alapú kemoterápiára, de rendkívül érzékeny a paclitaxelre (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Emellett a PM-LGSOC-01 különösen érzékeny a MEK-gátló trametinibre (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), mind in vitro, mind in vivo, ami a KRAS-mutációnak a terápiás válaszra gyakorolt hatását tükrözi.

A PM-LGSOC-01 értékes eszközként szolgál az LGSOC vizsgálatához, különösen a gyógyszerrezisztencia, a tumorigenitás és a célzott terápiákra, például a MEK-inhibitorokra való érzékenység összefüggésében. Használata az alacsony fokú szerózus petefészekrák személyre szabott kezelési megközelítéseinek kidolgozásában kritikus fontosságú, mivel az LGSOC a hagyományos kemoterápiára rosszul reagál a magas fokú szerózus petefészekrákhoz (HGSOC) képest.

Szövet
Petefészek
Betegség
Alacsony fokú serosus petefészek karcinóma
Áttétes hely
Peritoneum
Szinonimák
  • M28/2

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kettőzési idő
42 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
PM-LGSOC-01 (Cytion katalógusszám: 300305)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val)) mutáció

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
60 év