PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 ist eine Zelllinie, die aus einer peritonealen Metastase eines niedriggradigen serösen Ovarialkarzinoms (LGSOC) stammt. Diese Zelllinie wurde als Teil eines umfassenden Forschungsmodells erstellt, das auch ein von einer Patientin stammendes Xenotransplantat (PDX) umfasste. Die Herstellung von PM-LGSOC-01 erfolgte durch orthotopes Engrafting mittels subperitonealer Injektion von Tumorbrei in SCID/Beige-Mäuse, was zu einem transplantierbaren peritonealen Metastasen (PM)-PDX-Modell im Frühstadium führte. Die histologische Analyse bestätigte, dass sowohl die PM-PDX- als auch die PM-LGSOC-01-Zellen die für LGSOC typischen mikropapillären und cribriformen Wachstumsmuster aufwiesen, mit Tumorknospung und Expression von Markern wie PAX8 und WT1. Genetische Analysen ergaben, dass der Primärtumor, das PM und die Zelllinie eine KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val) Mutation aufweisen, was dieses Modell für die Untersuchung der LGSOC-Progression und des Therapieansprechens, insbesondere in Bezug auf den MAPK-Signalweg, relevant macht.

PM-LGSOC-01 weist wichtige Merkmale auf, die für die präklinische Forschung relevant sind. Die Zelllinie hat eine Verdopplungszeit von ca. 42 Stunden in frühen Passagen, die sich in späteren Stadien der Zellkultur auf 23 Stunden verringert, und wurde über 100 In-vitro-Passagen erhalten. Die Zelllinie weist eine epitheliale Morphologie mit epithelialer Organisation und hoher Zell-Zell-Adhäsion auf. Sie spricht jedoch nur begrenzt auf eine platinbasierte Chemotherapie an, ist aber sehr empfindlich gegenüber Paclitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Darüber hinaus ist PM-LGSOC-01 besonders empfindlich gegenüber dem MEK-Inhibitor Trametinib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), sowohl in vitro als auch in vivo, was die Auswirkungen der KRAS-Mutation auf das therapeutische Ansprechen widerspiegelt.

PM-LGSOC-01 ist ein wertvolles Instrument zur Untersuchung von LGSOC, insbesondere im Zusammenhang mit Arzneimittelresistenz, Tumorigenität und Empfindlichkeit gegenüber gezielten Therapien wie MEK-Inhibitoren. Sein Einsatz bei der Entwicklung personalisierter Behandlungsansätze für das niedriggradige seröse Ovarialkarzinom ist von entscheidender Bedeutung, da LGSOC im Vergleich zum hochgradigen serösen Ovarialkarzinom (HGSOC) schlecht auf konventionelle Chemotherapie anspricht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung