Langsung ke isi
PM-LGSOC-01
Tisu
Ovarium
Penyakit
Karsinoma ovarium serosa tingkat rendah
Lokasi metastasis
Peritoneum
Sinonim
M28/2

PM-LGSOC-01

Cell line · Nomor produk 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

PM-LGSOC-01 adalah garis sel yang berasal dari metastasis peritoneal karsinoma ovarium serosa tingkat rendah (LGSOC). Lini sel ini dibuat sebagai bagian dari model penelitian komprehensif yang juga mencakup xenograft yang berasal dari pasien (PDX). Pembuatan PM-LGSOC-01 melibatkan pencangkokan ortotopik melalui injeksi bubur tumor subperitoneal pada tikus SCID/Beige, yang mengarah pada model metastasis peritoneal transplantasi (PM)-PDX tahap awal. Analisis histologis mengkonfirmasi bahwa sel PM-PDX dan PM-LGSOC-01 mempertahankan pola pertumbuhan mikropapiler dan cribriform yang khas dari LGSOC, dengan tunas tumor, dan ekspresi penanda seperti PAX8 dan WT1. Analisis genetik menunjukkan bahwa tumor primer, PM, dan garis sel memiliki mutasi KRAS c.35 G> T (p.Gly12Val), menjadikan model ini relevan untuk mempelajari perkembangan LGSOC dan respons pengobatan, terutama dalam kaitannya dengan jalur MAPK.

PM-LGSOC-01 menunjukkan karakteristik utama yang relevan untuk penelitian praklinis. Ini memiliki waktu penggandaan sekitar 42 jam pada bagian awal, yang menurun menjadi 23 jam pada tahap akhir kultur sel, dan telah dipertahankan selama lebih dari 100 bagian in vitro. Garis sel menunjukkan morfologi epitel dengan organisasi seperti epitel dan adhesi sel-sel yang tinggi. Namun, ini menunjukkan respons terbatas terhadap kemoterapi berbasis platinum tetapi sangat sensitif terhadap paclitaxel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Selain itu, PM-LGSOC-01 sangat sensitif terhadap trametinib inhibitor MEK (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), baik secara in vitro maupun in vivo, yang mencerminkan dampak mutasi KRAS pada respons terapeutik.

PM-LGSOC-01 berfungsi sebagai alat yang berharga untuk menyelidiki LGSOC, terutama dalam konteks resistensi obat, tumorigenitas, dan sensitivitas terhadap terapi yang ditargetkan seperti penghambat MEK. Penggunaannya dalam mengembangkan pendekatan pengobatan yang dipersonalisasi untuk karsinoma ovarium serosa tingkat rendah sangat penting, mengingat responsifitas LGSOC yang buruk terhadap kemoterapi konvensional dibandingkan dengan karsinoma ovarium serosa tingkat tinggi (HGSOC).

Tisu
Ovarium
Penyakit
Karsinoma ovarium serosa tingkat rendah
Lokasi metastasis
Peritoneum
Sinonim
  • M28/2

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Waktu penggandaan
42 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
PM-LGSOC-01 (Nomor katalog Cytion 300305)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_xx32

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
Mutasi KRAS c.35 G > T (p. (Gly12Val))

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
60 tahun