الانتقال إلى المحتوى
PM-LGSOC-01
الأنسجة
المبيض
المرض
سرطان المبيض المصلّي منخفض الدرجة
موقع الانتشار
الصفاق
المرادفات
M28/2

المستندات

PM-LGSOC-01

Cell line · رقم المنتج 300305

PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

PM-LGSOC-01 هو خط خلوي مشتق من ورم خبيث بريتوني لسرطان المبيض المصلي منخفض الدرجة (LGSOC). وقد تم إنشاء هذا الخط الخلوي كجزء من نموذج بحثي شامل يتضمن أيضًا طعمًا مستمدًا من المريض (PDX). وتضمنت عملية استحداث الطعم الخبيث تحت الصفاق (PM-LGSOC-01) حقن طين الورم تحت الصفاق في فئران SCID/Beige، مما أدى إلى نموذج طعم خبيث بريتوني قابل للزرع في مرحلة مبكرة (PM) -PDX. أكد التحليل النسيجي أن كلاً من خلايا PM-PDX وخلايا PM-LGSOC-01 احتفظت بأنماط النمو الحليمي الدقيق والشرياني الشكل النموذجية للورم الخبيث البريتوني القابل للزرع، مع تبرعم الورم والتعبير عن علامات مثل PAX8 وWT1. وأظهر التحليل الوراثي أن الورم الأولي والورم الرئيسي وخط الخلية يشتركان في طفرة KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val)، مما يجعل هذا النموذج مناسبًا لدراسة تطور سرطان الخلايا الجذعية الخبيثة واستجابة العلاج، خاصة فيما يتعلق بمسار MAPK.

يتميز النموذج PM-LGSOC-01 بخصائص رئيسية ذات صلة بالأبحاث ما قبل السريرية. ويبلغ زمن تضاعفه حوالي 42 ساعة في الممرات المبكرة، والذي انخفض إلى 23 ساعة في المراحل اللاحقة من زراعة الخلايا، وتم الحفاظ عليه لأكثر من 100 ممر في المختبر. يُظهر الخط الخلوي مورفولوجيا الخلايا الظهارية مع تنظيم يشبه الظهارة والتصاق عالٍ بين الخلايا والخلية. ومع ذلك، فإنه يُظهر استجابة محدودة للعلاج الكيميائي القائم على البلاتين ولكنه شديد الحساسية للباكليتاكسيل (IC50: 6.3 ± 2.2 نانومتر). بالإضافة إلى ذلك، فإن PM-LGSOC-01 حساس بشكل خاص لمثبط MEK تراميتينيب (IC50: 7.2 ± 0.5 نانومتر)، سواء في المختبر أو في الجسم الحي، مما يعكس تأثير طفرة KRAS على الاستجابات العلاجية.

يُستخدم PM-LGSOC-01 كأداة قيّمة للتحقيق في LGSOC، لا سيما في سياق مقاومة الدواء، وتولّد الورم، والحساسية للعلاجات المستهدفة مثل مثبطات MEK. ويُعد استخدامه في تطوير مناهج علاجية مخصصة لسرطان المبيض المصلي منخفض الدرجة أمرًا بالغ الأهمية، نظرًا لضعف استجابة سرطان المبيض المصلي منخفض الدرجة للعلاج الكيميائي التقليدي مقارنة بسرطان المبيض المصلي عالي الدرجة (HGSOC).

الأنسجة
المبيض
المرض
سرطان المبيض المصلّي منخفض الدرجة
موقع الانتشار
الصفاق
المرادفات
  • M28/2

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
زمن المضاعفة
42 ساعة

04المعرّفات

المرجع
PM-LGSOC-01 (كتالوج سيتيون رقم 300305)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_xx32

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
طفرة KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val))

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
60 عاماً