PM-LGSOC-01
Cell line · Product number 300305
PM-LGSOC-01 is a cell line derived from peritoneal metastasis of a low-grade serous ovarian carcinoma (LGSOC). This cell line was established as part of a...
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01General information
- Description
PM-LGSOC-01 是一種源自低度惡性漿液性卵巢癌(LGSOC)腹膜轉移的細胞系。該細胞系是作為一項綜合研究模型的一部分而建立的,該模型同時還包含患者來源異種移植模型(PDX)。 PM-LGSOC-01 的建立是透過將腹膜下腫瘤懸浮液注射至 SCID/Beige 小鼠體內,進行原位移植,從而建立出早期可移植的腹膜轉移(PM)-PDX 模型。 組織學分析證實,PM-PDX 與 PM-LGSOC-01 細胞均保留了 LGSOC 典型的微乳頭狀及篩狀生長模式,並呈現腫瘤芽狀結構,同時表達 PAX8 和 WT1 等標記物。 基因分析顯示,原發性腫瘤、腹膜轉移(PM)及細胞系均攜帶 KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val) 突變,使此模型適用於研究 LGSOC 的進展及治療反應,特別是與 MAPK 路徑相關的部分。
PM-LGSOC-01 展現出與前臨床研究相關的關鍵特徵。其早期傳代的倍增時間約為 42 小時,在細胞培養後期階段縮短至 23 小時,並已維持超過 100 次體外傳代。 該細胞系呈現上皮狀形態,具有上皮樣組織結構及高度的細胞間黏附性。然而,其對鉑類化療的反應有限,但對紫杉醇高度敏感(IC50:6.3 ± 2.2 nM)。 此外,無論在體外或體內實驗中,PM-LGSOC-01 對 MEK 抑制劑特拉美替尼(IC50:7.2 ± 0.5 nM)均表現出特別高的敏感性,這反映了 KRAS 突變對治療反應的影響。
PM-LGSOC-01 是研究低級別漿液性卵巢癌(LGSOC)的寶貴工具,特別是在藥物抗藥性、致瘤性以及對 MEK 抑制劑等標靶治療的敏感性方面。 鑑於低級別漿液性卵巢癌(LGSOC)相較於高級別漿液性卵巢癌(HGSOC)對傳統化療的反應較差,該細胞系在開發低級別漿液性卵巢癌個人化治療方案方面至關重要。
- Tissue
- 卵巢
- Disease
- 低分化漿液性卵巢癌
- Metastatic site
- 腹膜
- Synonyms
- M28/2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Doubling time
- 42 小時
04Identifiers
- Citation
- PM-LGSOC-01(Cytion 型號 300305)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_xx32
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- KRAS c.35 G > T (p.(Gly12Val)) 突變
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 60年
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Third-party agreements apply
- Yes
