PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 est une lignée cellulaire dérivée d’une métastase péritonéale d’un carcinome ovarien séreux de bas grade (LGSOC). Cette lignée cellulaire a été établie dans le cadre d’un modèle de recherche complet comprenant également une xénogreffe dérivée d’une patiente (PDX). La création de PM-LGSOC-01 a nécessité une implantation orthotopique par injection de suspension tumorale sous-péritonéale chez des souris SCID/Beige, ce qui a permis d’obtenir un modèle PDX de métastases péritonéales (PM) transplantable à un stade précoce. L’analyse histologique a confirmé que tant les cellules du modèle PM-PDX que celles de la lignée PM-LGSOC-01 conservaient les schémas de croissance micropapillaires et cribriformes typiques du LGSOC, avec formation de bourgeons tumoraux et expression de marqueurs tels que PAX8 et WT1. L’analyse génétique a montré que la tumeur primaire, la PM et la lignée cellulaire partagent une mutation KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), ce qui rend ce modèle pertinent pour l’étude de la progression du LGSOC et de la réponse au traitement, en particulier en ce qui concerne la voie MAPK.

La lignée PM-LGSOC-01 présente des caractéristiques clés pertinentes pour la recherche préclinique. Elle a un temps de doublement d’environ 42 heures lors des premiers passages, qui est tombé à 23 heures aux stades ultérieurs de la culture cellulaire, et a été maintenue pendant plus de 100 passages in vitro. La lignée cellulaire présente une morphologie épithéliale avec une organisation de type épithélial et une forte adhérence intercellulaire. Elle montre toutefois une réponse limitée à la chimiothérapie à base de platine, mais est très sensible au paclitaxel (CI₅₀ : 6,3 ± 2,2 nM). De plus, la lignée PM-LGSOC-01 est particulièrement sensible à l’inhibiteur de MEK tramétinib (CI₅₀ : 7,2 ± 0,5 nM), tant in vitro qu’in vivo, ce qui reflète l’impact de la mutation KRAS sur les réponses thérapeutiques.

Le PM-LGSOC-01 constitue un outil précieux pour l’étude du LGSOC, notamment en ce qui concerne la résistance aux médicaments, la tumorigénicité et la sensibilité aux thérapies ciblées telles que les inhibiteurs de MEK. Son utilisation dans l’élaboration d’approches thérapeutiques personnalisées pour le carcinome ovarien séreux de bas grade est essentielle, compte tenu de la faible réponse du LGSOC à la chimiothérapie conventionnelle par rapport au carcinome ovarien séreux de haut grade (HGSOC).

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.