PM-LGSOC-01

PM-LGSOC-01 to linia komórkowa pochodząca z przerzutów do otrzewnej surowiczego raka jajnika o niskim stopniu złośliwości (LGSOC). Ta linia komórkowa została utworzona jako część kompleksowego modelu badawczego, który obejmował również ksenograft pochodzący od pacjentki (PDX). Stworzenie PM-LGSOC-01 polegało na ortotopowym wszczepieniu poprzez podotrzewnowe wstrzyknięcie zawiesiny guza myszom SCID/Beige, co doprowadziło do powstania wczesnego stadium przeszczepialnego modelu przerzutów do otrzewnej (PM) - PDX. Analiza histologiczna potwierdziła, że zarówno komórki PM-PDX, jak i PM-LGSOC-01 zachowały typowe dla LGSOC mikropapilarne i żebrowe wzorce wzrostu, z pączkowaniem guza i ekspresją markerów takich jak PAX8 i WT1. Analiza genetyczna wykazała, że guz pierwotny, PM i linia komórkowa mają wspólną mutację KRAS c.35 G > T (p.Gly12Val), co czyni ten model istotnym dla badania progresji LGSOC i odpowiedzi na leczenie, szczególnie w odniesieniu do szlaku MAPK.

PM-LGSOC-01 wykazuje kluczowe cechy istotne dla badań przedklinicznych. Ma czas podwojenia wynoszący około 42 godzin we wczesnych pasażach, który zmniejszył się do 23 godzin w późniejszych etapach hodowli komórkowej i był utrzymywany przez ponad 100 pasaży in vitro. Linia komórkowa wykazuje morfologię nabłonkową z organizacją podobną do nabłonka i wysoką adhezją komórka-komórka. Wykazuje jednak ograniczoną odpowiedź na chemioterapię opartą na platynie, ale jest bardzo wrażliwa na paklitaksel (IC50: 6,3 ± 2,2 nM). Ponadto PM-LGSOC-01 jest szczególnie wrażliwy na inhibitor MEK trametynib (IC50: 7,2 ± 0,5 nM), zarówno in vitro, jak i in vivo, co odzwierciedla wpływ mutacji KRAS na odpowiedzi terapeutyczne.

PM-LGSOC-01 służy jako cenne narzędzie do badania LGSOC, szczególnie w kontekście oporności na leki, nowotworowości i wrażliwości na terapie celowane, takie jak inhibitory MEK. Jego zastosowanie w opracowywaniu spersonalizowanych metod leczenia surowiczego raka jajnika o niskim stopniu złośliwości ma kluczowe znaczenie, biorąc pod uwagę słabą reakcję LGSOC na konwencjonalną chemioterapię w porównaniu z surowiczym rakiem jajnika o wysokim stopniu złośliwości (HGSOC).

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym