CMT-93

La lignée cellulaire CMT93 est un modèle murin de carcinome colorectal établi à partir d’une tumeur rectale induite chimiquement chez une souris C57BL/ICRF. La tumeur est apparue à la suite d’une exposition à l’acétate de méthylazoxyméthanol (acétate de MAM), un puissant cancérigène. La lignée CMT93 a été dérivée de la quatrième génération de greffes in vivo de la tumeur d’origine et cultivée à l’aide de techniques de trypsinisation sélective visant à isoler les populations épithéliales tout en éliminant les contaminants mésenchymateux. Grâce à des sous-cultures et à des purifications répétées, la lignée cellulaire obtenue a présenté une morphologie épithéliale et un profil de croissance stables.

In vitro, les cellules CMT93 se développent en amas épithéliaux cohérents et présentent les caractéristiques typiques des cellules épithéliales intestinales différenciées. La microscopie électronique a révélé la présence de microvillosités comportant des brins de glycoprotéines, de jonctions desmosomales et, occasionnellement, de structures de type acine, ce qui suggère une conservation partielle de l’architecture épithéliale rectale normale. Ces cellules sont hautement adhérentes et atteignent la confluence en environ 7 jours après un divisemet au rapport de 1:2. Bien que prédominamment épithéliales, les premiers passages comprenaient des populations mixtes, qui ont été éliminées par des sous-cultures sélectives successives. La lignée a été maintenue pendant de nombreux passages et cryoconservée avec succès en vue d’une utilisation à long terme.

La lignée CMT93 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer gastro-intestinal, en particulier dans les études portant sur la carcinogenèse colorectale, les interactions épithélio-mésenchymateuses, les réponses immunitaires et les interactions microbe-hôte. Elle est également utilisée dans des études de profilage par répétitions en tandem courtes (STR) afin de faciliter l’authentification intra-espèce des lignées cellulaires de souris, ce qui confirme son identité unique et sa valeur en tant que modèle validé dans la recherche préclinique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.