CMT-93

CMT93-solulinja on hiiren paksusuolisyövän malli, joka on kehitetty C57BL/ICRF-hiiren kemiallisesti indusoidusta peräsuolikasvaimesta. Kasvain syntyi altistumisen seurauksena metyyliatsoksimetanoliasetaatille (MAM-asetaatti), joka on voimakas karsinogeeni. CMT93 johdettiin alkuperäisen kasvaimen neljännestä in vivo -siirto-sukupolvesta ja viljeltiin käyttämällä selektiivisiä trypsinointitekniikoita epiteelipopulaatioiden eristämiseksi ja mesenkymaalisten kontaminanttien poistamiseksi. Toistuvien aliviljelyjen ja puhdistusten kautta tuloksena saatu solulinja osoitti vakaata epiteelimorfologiaa ja kasvumallia.

In vitro CMT93-solut kasvavat yhtenäisinä epiteeliklustereina ja niillä on erilaistuneiden suoliston epiteelisolujen tunnusomaisia piirteitä. Elektronimikroskopia paljasti glykoproteiinisäikeitä sisältävien mikrovillien, desmosomaalisten liitosten ja satunnaisten asinusmaisten rakenteiden läsnäolon, mikä viittaa normaalin peräsuolen epiteelirakenteen osittaiseen säilymiseen. Nämä solut ovat erittäin tarttuvia ja kasvavat konfluenssiin noin 7 päivässä 1:2-jakamisen jälkeen. Vaikka solut ovat pääasiassa epiteelisoluja, varhaisissa viljelykierroksissa oli sekapopulaatioita, jotka ratkaistiin peräkkäisillä valikoivilla aliviljelyillä. Linjaa on ylläpidetty lukuisilla viljelykierroksilla ja se on kryosäilytetty onnistuneesti pitkäaikaista käyttöä varten.

CMT93:a käytetään laajalti ruoansulatuskanavan syövän tutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa tutkitaan kolorektaalisen syövän syntyä, epiteeli-mesenkymaalisia vuorovaikutuksia, immuunivasteita ja mikrobi-isäntä-vuorovaikutuksia. Sitä käytetään myös lyhyiden tandemtoistojen (STR) profilointitutkimuksissa hiirisolulinjojen lajin sisäisen autentikoinnin tukena, mikä vahvistaa sen ainutlaatuisen identiteetin ja arvon validoituna mallina prekliinisessä tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa